醫(yī)械創(chuàng)新資訊
國家藥監(jiān)局器審中心關(guān)于發(fā)布新型冠狀病毒（2019-nCoV）核酸檢測試劑等3項注冊審查指導(dǎo)原則的通告（2022年第18號）
醫(yī)療器械技術(shù)審評中心
2022年4月27日
附件1
新型冠狀病毒（2019-nCoV）核酸檢測試劑注冊審查指導(dǎo)原則?
本指導(dǎo)原則旨在指導(dǎo)注冊申請人對新型冠狀病毒（2019-nCoV）核酸檢測試劑（以下簡稱“新冠病毒核酸檢測試劑”）注冊申報資料的準(zhǔn)備及撰寫，同時也為技術(shù)審評部門提供參考。
本指導(dǎo)原則是對新冠病毒核酸檢測試劑的一般要求，申請人應(yīng)依據(jù)產(chǎn)品的具體特性確定其中內(nèi)容是否適用。若不適用，需具體闡述理由及相應(yīng)的科學(xué)依據(jù)，并依據(jù)產(chǎn)品的具體特性對注冊申報資料的內(nèi)容進(jìn)行充實和細(xì)化。
本指導(dǎo)原則是供注冊申請人和技術(shù)審評人員使用的指導(dǎo)性文件，但不包括審評審批所涉及的行政事項，亦不作為法規(guī)強(qiáng)制執(zhí)行，應(yīng)在遵循相關(guān)法規(guī)的前提下使用本指導(dǎo)原則。如果有能夠滿足相關(guān)法規(guī)要求的其他方法，也可以采用，但是需要提供詳細(xì)的研究資料和驗證資料。
本指導(dǎo)原則是在現(xiàn)行法規(guī)和標(biāo)準(zhǔn)體系以及當(dāng)前認(rèn)知水平下制定，隨著法規(guī)和標(biāo)準(zhǔn)的不斷完善，以及科學(xué)技術(shù)的不斷發(fā)展，相關(guān)內(nèi)容也將適時進(jìn)行調(diào)整。
一、適用范圍
新型冠狀病毒（2019-nCoV）屬于β屬冠狀病毒，有包膜，顆粒呈圓形或橢圓形，直徑約為60~140nm。具有5個必需基因，分別針對核蛋白（N）、病毒包膜（E）、基質(zhì)蛋白（M）和刺突蛋白（S）4種結(jié)構(gòu)蛋白及RNA依賴性的RNA聚合酶（RdRp）。核蛋白（N）包裹RNA基因組構(gòu)成核衣殼，外面圍繞著病毒包膜（E）,病毒包膜包埋有基質(zhì)蛋白（M）和刺突蛋白（S）等蛋白。
實驗室檢查包括一般檢查，病原學(xué)及血清學(xué)檢查，胸部影像學(xué)檢查等。病原學(xué)檢查又包括核酸檢測和抗原檢測。核酸檢測主要采用逆轉(zhuǎn)錄PCR，二代測序等方法，在鼻、口咽拭子、痰液和其他下呼吸道分泌物等標(biāo)本中均可檢測出新型冠狀病毒核酸。
新型冠狀病毒在流行過程中基因組不斷發(fā)生變異，新的變異株可能在傳播力、致病性、免疫逃逸能力等方面發(fā)生改變。變異株可能影響檢測試劑的性能，甚至出現(xiàn)漏檢。
本指導(dǎo)原則適用于采用逆轉(zhuǎn)錄實時熒光 PCR法，對咽拭子、鼻咽拭子、肺泡灌洗液或痰液等呼吸道樣本中的新型冠狀病毒(2019-nCoV )核酸進(jìn)行體外定性的檢測試劑。
對于采用其他方法學(xué)的新冠病毒核酸檢測試劑，可能部分要求不完全適用或本文所述內(nèi)容不夠全面，申請人應(yīng)參照本指導(dǎo)原則，根據(jù)產(chǎn)品特性對適用部分進(jìn)行評價，并補(bǔ)充其他的評價資料。
本指導(dǎo)原則適用于新冠病毒核酸檢測試劑注冊申請和變更注冊申請的情形。本指導(dǎo)原則針對新冠病毒核酸檢測試劑注冊申報資料中的部分內(nèi)容進(jìn)行撰寫，其他未盡事宜應(yīng)當(dāng)符合《關(guān)于公布體外診斷試劑注冊申報資料要求和批準(zhǔn)證明文件格式的公告》（國家藥品監(jiān)督管理局公告2021年第122號）等相關(guān)法規(guī)要求。
二、注冊審查要點
（一）監(jiān)管信息
1. 產(chǎn)品名稱及分類編碼
產(chǎn)品名稱應(yīng)符合《體外診斷試劑注冊與備案管理辦法》（國家市場監(jiān)督管理總局令第48號）及相關(guān)法規(guī)的要求，如新型冠狀病毒（2019-nCoV）核酸檢測試劑盒（熒光PCR法）。根據(jù)《體外診斷試劑分類規(guī)則》，該產(chǎn)品按照第三類體外診斷試劑管理，分類編碼為6840。
2. 其他信息還包括產(chǎn)品列表、關(guān)聯(lián)文件、申報前與監(jiān)管機(jī)構(gòu)的聯(lián)系情況和溝通記錄以及符合性聲明等文件。
（二）綜述資料
綜述資料主要包括概述、產(chǎn)品描述、預(yù)期用途、申報產(chǎn)品上市歷史及其他需說明的內(nèi)容。應(yīng)詳細(xì)說明產(chǎn)品所采用的技術(shù)原理及檢測流程。提供不同適用機(jī)型的檢測通量，即一次檢測最多可檢測的樣本數(shù)。提供核酸提取（手工和自動提取方式應(yīng)分別明確）和PCR擴(kuò)增的時間，以及檢測全過程所需的時間。不同檢測流程，分別提供最少和最多檢測樣本量下的檢測時間。與已上市同類產(chǎn)品進(jìn)行比較，比較內(nèi)容包括樣本類型，檢測原理，檢測靶基因，組成成分，內(nèi)標(biāo)，質(zhì)控品，判讀規(guī)則，分析性能和臨床性能等。
預(yù)期用途中明確產(chǎn)品檢測的靶基因，需選擇保守性和特異性相對較高的基因，同時還應(yīng)考慮基因的擴(kuò)增效率。具體檢測基因一般為ORF1ab和N基因，如果檢測其他基因，應(yīng)提供相關(guān)指南或文獻(xiàn)，并分析所檢測基因的靈敏度和特異性是否符合臨床需求。
（三）非臨床資料
1. 產(chǎn)品技術(shù)要求及檢驗報告
注冊申請人應(yīng)當(dāng)在原材料質(zhì)量和生產(chǎn)工藝穩(wěn)定的前提下，根據(jù)產(chǎn)品研制、前期評價等結(jié)果，依據(jù)國家標(biāo)準(zhǔn)、行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)及有關(guān)文獻(xiàn)資料，結(jié)合產(chǎn)品特性按照《醫(yī)療器械產(chǎn)品技術(shù)要求編寫指導(dǎo)原則》（2022年第8號）的要求編寫。該類產(chǎn)品作為第三類體外診斷試劑，應(yīng)當(dāng)以附錄形式明確主要原材料以及生產(chǎn)工藝要求。
新冠病毒核酸檢測試劑已有國家標(biāo)準(zhǔn)品，技術(shù)要求中應(yīng)體現(xiàn)國家標(biāo)準(zhǔn)品的相關(guān)要求，并使用國家標(biāo)準(zhǔn)品對三批產(chǎn)品進(jìn)行檢驗。
新冠病毒核酸檢測試劑的檢出限水平應(yīng)符合國家相關(guān)指南文件規(guī)定，申報產(chǎn)品對國家靈敏度標(biāo)準(zhǔn)品的檢測結(jié)果應(yīng)與聲稱的檢出限水平相當(dāng)。
如有適用的國家標(biāo)準(zhǔn)、行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)，產(chǎn)品技術(shù)要求的相關(guān)要求應(yīng)不低于相應(yīng)的要求。
2. 分析性能研究
注冊申請人應(yīng)采用在符合質(zhì)量管理體系的環(huán)境下生產(chǎn)的試劑盒進(jìn)行所有分析性能研究，提交具體研究方法、試驗方案、試驗數(shù)據(jù)、統(tǒng)計分析等詳細(xì)資料。
如申報產(chǎn)品適用不同的機(jī)型，需要提交采用不同機(jī)型進(jìn)行性能評估的資料。如申報產(chǎn)品包含不同的包裝規(guī)格，需要對各包裝規(guī)格進(jìn)行分析或驗證。
適用的不同樣本類型應(yīng)分別進(jìn)行分析性能研究。
分析性能評估所用樣本的基本信息均需明確，例如樣本來源、樣本類型、采集和處理方式、稀釋方式、定值過程及數(shù)據(jù)等。研究中采用的新冠病毒陽性樣本，應(yīng)采用科學(xué)合理的方法確定其陰陽性和濃度水平，提交具體的試驗資料。分析性能評估用樣本一般應(yīng)為真實樣本，如涉及稀釋后檢測，應(yīng)采用與適用樣本類型一致的陰性基質(zhì)。不可采用質(zhì)粒進(jìn)行分析性能評估。對于各項性能中采用的樣本，在下述各項性能研究資料中分別提供樣本信息列表。
2.1樣本穩(wěn)定性
考慮到病毒RNA極易被降解的特性，應(yīng)對樣本穩(wěn)定性進(jìn)行詳細(xì)研究，包括采集后未經(jīng)處理的樣本，加入不同裂解液/消化液的樣本，滅活處理后的樣本，研究內(nèi)容包括冷藏保存時間，冷凍保存時間，凍融次數(shù)等。
如產(chǎn)品適用拭子、痰液等不同的樣本類型，因其中干擾物質(zhì)存在較大差異，可能對病毒RNA降解的影響不同，建議對每種樣本類型均進(jìn)行穩(wěn)定性研究。
如核酸提取液可不立即進(jìn)行檢測，還需對核酸提取液的保存條件和穩(wěn)定性進(jìn)行研究。
2.2適用的樣本類型
列明產(chǎn)品適用的樣本類型。
2.3企業(yè)參考品驗證
根據(jù)主要原材料研究資料中的企業(yè)參考品設(shè)置情況，采用三批產(chǎn)品對企業(yè)參考品進(jìn)行檢驗并提供詳細(xì)的試驗數(shù)據(jù)。
2.4精密度
應(yīng)對精密度指標(biāo)，如標(biāo)準(zhǔn)差或變異系數(shù)等的評價標(biāo)準(zhǔn)做出合理要求。應(yīng)考慮運行、時間、操作者、儀器、試劑批次和地點等影響精密度的條件，設(shè)計合理的精密度試驗方案進(jìn)行評價。精密度評價試驗應(yīng)包含核酸提取步驟。設(shè)定合理的精密度評價周期，例如為期至少20天的檢測。對檢測數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計分析，獲得重復(fù)性、實驗室內(nèi)精密度、實驗室間精密度、批間精密度等結(jié)果。
采用臨床樣本進(jìn)行精密度評價，應(yīng)至少包含3個水平：陰性樣本、臨界陽性樣本、中/強(qiáng)陽性樣本，并根據(jù)產(chǎn)品特性設(shè)定適當(dāng)?shù)木芏纫?，例如?/span>
陰性樣本：待測物濃度低于檢出限或為零濃度，陰性檢出率應(yīng)為100%（n≥20）。
臨界陽性樣本：待測物濃度略高于試劑盒的檢出限，陽性檢出率應(yīng)≥95%（n≥20）。
中/強(qiáng)陽性樣本：待測物濃度呈中度到強(qiáng)陽性，陽性檢出率為100%且Ct值的CV≤5%（n≥20）。
2.5包容性
2.5.1病毒樣本的驗證
驗證具有時間和區(qū)域特征性的至少20個不同來源的陽性樣本（臨床樣本或病毒培養(yǎng)物），應(yīng)包括檢出限和重復(fù)性的驗證。樣本應(yīng)覆蓋目前國內(nèi)流行的變異株型別，并適當(dāng)納入其他代表性的變異株。注意包容性研究樣本和檢出限研究樣本不能重復(fù)。
2.5.2生物信息學(xué)分析及人工合成樣本的驗證
按照器審中心另行公布的變異株驗證相關(guān)要求進(jìn)行評價。
2.6檢出限
2.6.1檢出限的確定
將不同來源的至少5個新冠病毒樣本梯度稀釋于與適用樣本一致的基質(zhì)中，進(jìn)行檢出限的確定。每個濃度梯度最少重復(fù)3次檢測，以100%可檢出的最低濃度水平作為估計檢出限，在此濃度附近制備若干梯度濃度樣本，每個濃度至少重復(fù)20次檢測，將具有95%陽性檢出率的最低濃度水平作為確定的檢出限。
2.6.2檢出限的驗證
選擇另外5個不同來源的新冠病毒樣本在檢出限濃度水平進(jìn)行驗證，應(yīng)達(dá)到95%陽性檢出率。
2.7分析特異性
2.7.1交叉反應(yīng)
需驗證相關(guān)病原體和多例人類基因組DNA（表1）的交叉反應(yīng)。除SARS冠狀病毒和MERS冠狀病毒可采用假病毒外，各病原體均應(yīng)采用臨床樣本或培養(yǎng)物進(jìn)行驗證。建議在病毒和細(xì)菌感染的醫(yī)學(xué)相關(guān)水平進(jìn)行交叉反應(yīng)的驗證。通常，細(xì)菌感染的濃度水平為106CFU/mL或更高，病毒為105PFU/mL或更高，提供所有用于交叉反應(yīng)驗證的病原體樣本的來源、陰陽性、種屬/型別和濃度確認(rèn)等試驗資料。?
表1 需進(jìn)行交叉反應(yīng)驗證的物質(zhì)
2.7.2競爭性干擾
申請人應(yīng)充分考慮臨床上容易與新冠病毒合并感染的病原體，在高濃度的情況下對低濃度（例如檢出限濃度）新冠病毒核酸檢測的影響，進(jìn)行競爭性干擾研究。
2.7.3干擾試驗
應(yīng)根據(jù)所采集樣本類型，針對可能存在的內(nèi)源/外源物質(zhì)干擾情況進(jìn)行驗證。建議申請人在每種干擾物質(zhì)的潛在最大濃度（“最差條件”）條件下進(jìn)行試驗，檢測包含臨界陽性水平在內(nèi)的新冠病毒樣本。對結(jié)果進(jìn)行合理的統(tǒng)計分析，對比添加干擾物質(zhì)前后的 Ct 值差異。檢測的潛在干擾物包括樣本中的原有物質(zhì)及在樣本采集和處理期間引入的物質(zhì)。?
表2 用于干擾試驗的物質(zhì)
2.8核酸（RNA）提取/純化性能?
在進(jìn)行核酸檢測之前，建議有核酸（RNA）提取/純化步驟。該步驟的目的除最大量分離出目的RNA外，還應(yīng)有相應(yīng)的純化作用，盡可能去除PCR抑制物。對配合使用的所有核酸提取試劑進(jìn)行提取核酸純度、濃度、提取效率的研究，并與質(zhì)量較好的核酸提取試劑進(jìn)行平行比對。若產(chǎn)品適用兩種或以上核酸提取試劑，則每一種核酸提取試劑均需配合檢測試劑進(jìn)行抗干擾、精密度和檢出限的驗證。
2.9反應(yīng)體系
2.9.1樣本采集和處理
2.9.1.1樣本采集方式的選擇
2.9.1.2樣本采集時間點的選擇：是否受病程、臨床癥狀、用藥情況等因素的影響。
2.9.1.3采樣拭子及樣本保存液的選擇：對拭子頭和拭子桿的材質(zhì)要求。明確保存液或裂解液的成分、濃度、使用量的要求等。配套的不同保存液或裂解液需驗證檢出限和重復(fù)性。
2.9.1.4樣本處理方式的選擇：研究產(chǎn)品適用的滅活方式，包括熱滅活和化學(xué)滅活，研究內(nèi)容包括胍鹽的使用濃度及用量、樣本用量。如適用，對痰液消化方式及消化液進(jìn)行研究。
2.9.2核酸提取和反應(yīng)體系
研究確定最佳核酸提取和反應(yīng)體系，包括核酸提取用的樣本體積、洗脫體積和PCR加樣體積、各種酶濃度、引物/探針濃度、dNTP濃度、陽離子濃度及反應(yīng)各階段溫度、時間、循環(huán)數(shù)等。建議在保證核酸提取質(zhì)量的情況下盡量擴(kuò)大總反應(yīng)體系和加樣量，以提高檢測靈敏度。
反應(yīng)體系研究應(yīng)確保不同基因的檢測能力具有一致性，對于結(jié)果為單基因陽性時需要復(fù)測的試劑，需使用至少10例臨床樣本梯度稀釋，觀察各基因檢出情況是否存在顯著差異，避免過高的復(fù)測率。
提交不同適用機(jī)型基線和閾值循環(huán)數(shù)的確定資料。
不同適用機(jī)型的反應(yīng)條件如果有差異應(yīng)分別詳述，并提交驗證資料。
3. 穩(wěn)定性研究
申報試劑的穩(wěn)定性主要包括實時穩(wěn)定性（有效期）、開瓶穩(wěn)定性及凍融次數(shù)限制等研究，申請人可根據(jù)實際需要選擇合理的穩(wěn)定性研究方案。穩(wěn)定性研究資料應(yīng)包括具體的實施方案、詳細(xì)的研究數(shù)據(jù)以及統(tǒng)計分析結(jié)論。對于實時穩(wěn)定性研究，應(yīng)提供至少三批產(chǎn)品在實際儲存條件下保存至成品有效期后的研究資料。
4. 陽性判斷值研究
陽性判斷值一般為申報產(chǎn)品檢測病毒核酸陽性的Ct值。陽性判斷值研究用樣本來源應(yīng)具有多樣性和代表性，考慮不同時間、地域、不同的感染階段和生理狀態(tài)等因素，盡量納入較多弱陽性和高陰性水平的樣本。在條件允許的情況下，建議覆蓋目前的流行株進(jìn)行陽性判斷值研究。采用ROC曲線分析建立每個檢測靶基因的陽性判斷值，然后確定產(chǎn)品的判讀規(guī)則（單基因陽性、雙基因陽性等）。對于結(jié)果為單基因陽性時需要復(fù)測的試劑，建議對陽性判斷值研究數(shù)據(jù)進(jìn)行復(fù)測率的統(tǒng)計分析。如判定值存在灰區(qū)，應(yīng)提供灰區(qū)的確認(rèn)資料。
如果產(chǎn)品適用不同樣本類型，需要對各樣本類型進(jìn)行陽性判斷值的驗證。
提交陽性判斷值研究所用樣本的背景信息列表，至少包括性別、年齡、臨床診斷信息、樣本來源機(jī)構(gòu)、檢測結(jié)果等信息。
提供內(nèi)標(biāo)檢測結(jié)果范圍的確定方法和研究資料。
5. 其他資料
5.1主要原材料研究資料
該類產(chǎn)品的主要原材料包括引物、探針、酶、dNTP、核酸分離/純化組分（如有）、質(zhì)控品、參考品等。應(yīng)提供主要原材料的選擇與來源、制備過程、質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)等相關(guān)研究資料、質(zhì)控品的定值試驗資料等。如主要原材料為企業(yè)自制，應(yīng)提供其詳細(xì)制備過程；如主要原材料源于外購，應(yīng)提供資料包括：選擇該原材料的依據(jù)及對比篩選試驗資料、供貨方提供的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)、出廠檢驗報告，以及該原材料到貨后的質(zhì)量檢驗資料。供應(yīng)商應(yīng)固定，不得隨意更換。
5.1.1引物和探針：應(yīng)詳述引物和探針的設(shè)計原則，提供引物、探針核酸序列、靶序列的基因位點及兩者的對應(yīng)情況。建議每種病毒設(shè)計兩套或多套引物、探針以供篩選，通過序列比對和功能性試驗等方式，對病毒進(jìn)行包容性和特異性（如交叉反應(yīng)）的評價，其中序列比對包括與已公布新冠病毒序列的比對，及與易產(chǎn)生交叉反應(yīng)的其他病原體的序列比對；功能性試驗包括對不同來源、不同滴度的新冠病毒核酸陽性樣本，和不同的近緣病原體的檢測。通過篩選確定最佳的引物和探針組合。引物、探針的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)應(yīng)至少包括序列準(zhǔn)確性、純度、濃度及功能性實驗等。
5.1.2脫氧三磷酸核苷（dNTP）：包括dATP、dGTP、dCTP、dTTP、dUTP，應(yīng)提供對其純度、濃度、功能性等的詳細(xì)驗證資料。
5.1.3酶：需要的酶主要包括DNA聚合酶、逆轉(zhuǎn)錄酶、尿嘧啶DNA糖基化酶等，應(yīng)分別對酶活性、功能性等進(jìn)行評價和驗證。
5.1.4質(zhì)控品
試劑盒一般包含陰性質(zhì)控品和陽性質(zhì)控品。陽性質(zhì)控品應(yīng)包含試劑盒檢測的靶序列，可采用假病毒制備。質(zhì)控品需參與樣本處理、核酸的平行提取和檢測的全過程，以對整個提取和PCR擴(kuò)增過程、試劑/設(shè)備、交叉污染等環(huán)節(jié)進(jìn)行合理質(zhì)量控制。提交試劑盒質(zhì)控品有關(guān)原料選擇、制備、定值過程、濃度范圍等試驗資料，對質(zhì)控品的檢測結(jié)果Ct值范圍做出明確的要求。
5.1.5內(nèi)標(biāo)
內(nèi)標(biāo)，又稱內(nèi)對照，可對管內(nèi)抑制導(dǎo)致的假陰性結(jié)果進(jìn)行質(zhì)量控制，應(yīng)與靶核酸一同提取及擴(kuò)增。申請人需對內(nèi)標(biāo)的引物、探針設(shè)計和相關(guān)反應(yīng)體系的濃度做精確驗證，既要保證內(nèi)標(biāo)熒光通道呈明顯的陽性曲線又要盡量降低對靶基因檢測造成的抑制。明確內(nèi)標(biāo)的檢測結(jié)果Ct值范圍。建議科學(xué)設(shè)置內(nèi)標(biāo)，對待測樣本的取樣質(zhì)量、試劑的反應(yīng)體系進(jìn)行監(jiān)控。
5.1.6企業(yè)參考品
該類產(chǎn)品的企業(yè)參考品一般包括陽性參考品、陰性參考品、檢出限參考品和重復(fù)性參考品。應(yīng)根據(jù)產(chǎn)品性能驗證的實際需要設(shè)置企業(yè)參考品。
應(yīng)提交企業(yè)參考品的原料來源、選擇、制備、陰陽性及濃度確認(rèn)方法或試劑等相關(guān)驗證資料。企業(yè)參考品應(yīng)采用臨床樣本，或者使用病毒培養(yǎng)物加入陰性基質(zhì)。企業(yè)參考品的設(shè)置建議如下：
陽性參考品：應(yīng)著重考慮不同來源的病毒樣本和滴度要求，應(yīng)至少選取不同來源的5個病毒樣本。
陰性參考品：主要涉及對交叉反應(yīng)的驗證情況，建議包括冠狀病毒（HKU1、OC43、NL63、229E）、SARS冠狀病毒（可采用假病毒）、MERS冠狀病毒（可采用假病毒）、流感病毒、副流感病毒、呼吸道合胞病毒、腺病毒等。
檢出限參考品：可采用95%陽性檢出水平或略高于檢出限的水平，如100%陽性檢出水平。
重復(fù)性參考品：建議包括高、低兩個濃度的樣本，其中一個濃度應(yīng)為檢出限附近的濃度。
5.2生產(chǎn)工藝研究資料
介紹產(chǎn)品主要生產(chǎn)工藝，可用流程圖結(jié)合文字的方式表述。提交主要生產(chǎn)工藝的確定及優(yōu)化研究資料。
（四）臨床評價資料
該類試劑應(yīng)通過臨床試驗路徑進(jìn)行臨床評價。臨床試驗應(yīng)滿足《體外診斷試劑臨床試驗技術(shù)指導(dǎo)原則》（國家藥品監(jiān)督管理局通告2021年第72號）的要求，如相關(guān)法規(guī)、文件有更新，臨床試驗應(yīng)符合更新后的要求。下面僅說明該類試劑臨床試驗中應(yīng)關(guān)注的重點問題。
該類試劑臨床試驗應(yīng)按要求在三家以上臨床試驗機(jī)構(gòu)進(jìn)行，開展臨床試驗的機(jī)構(gòu)應(yīng)按要求經(jīng)國家藥品監(jiān)督管理局醫(yī)療器械臨床試驗機(jī)構(gòu)備案系統(tǒng)備案。
1. 試驗設(shè)計
采用試驗體外診斷試劑與已上市同類產(chǎn)品及臨床參考標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行比較研究，從而對產(chǎn)品臨床性能進(jìn)行確認(rèn)。
2. 受試者選擇
臨床試驗的入組人群應(yīng)為產(chǎn)品的預(yù)期適用人群，該產(chǎn)品的適用人群包括：新型冠狀病毒感染的疑似病例，以及根據(jù)國家衛(wèi)生健康委員會相關(guān)規(guī)定需到臨床試驗機(jī)構(gòu)就診并進(jìn)行新冠病毒核酸檢測的其他人群。臨床試驗入組人群應(yīng)以新冠疑似病例為主，并能代表適用人群的各種情形，如：最終確診病例應(yīng)包括不同病毒載量（根據(jù)對比試劑核酸檢測結(jié)果確定）的病例，最終排除病例應(yīng)適當(dāng)納入有疑似癥狀的其他呼吸道病原體感染病例。應(yīng)注意，排除病例應(yīng)絕大部分來源于疑似病例，也可適量納入部分出院排除病例和其他疾病患者。
國家衛(wèi)生健康委員會發(fā)布了《新型冠狀病毒肺炎診療方案》《新型冠狀病毒肺炎防控方案》和其他相關(guān)診療指南，申請人在進(jìn)行臨床試驗時應(yīng)考慮現(xiàn)行方案對疑似病例和其他適用人群的規(guī)定，按照規(guī)定入組病例進(jìn)行臨床試驗。
3. 臨床試驗樣本要求
試驗體外診斷試劑可同時適用于上呼吸道樣本和下呼吸道樣本，也可僅適用于上呼吸道樣本。建議按照《新冠病毒樣本采集和檢測技術(shù)指南》進(jìn)行樣本采集。
應(yīng)采用臨床原始樣本進(jìn)行臨床試驗。臨床試驗所用樣本類型、樣本采集、樣本處理、樣本穩(wěn)定性、核酸提取純化及結(jié)果判讀等應(yīng)分別滿足試驗體外診斷試劑與對比試劑產(chǎn)品說明書的要求，并在臨床試驗小結(jié)和報告中明確上述內(nèi)容。臨床試驗前應(yīng)對上述內(nèi)容進(jìn)行充分的性能評估。
4. 臨床試驗樣本量
應(yīng)基于與對比試劑的比較研究估算臨床試驗樣本量。根據(jù)已有研究數(shù)據(jù)進(jìn)行初步估算，建議對比試劑（核酸檢測試劑）檢測陽性樣本不少于200例，陰性樣本不少于300例。如涉及多種樣本類型，每種樣本類型的陽性和陰性樣本例數(shù)建議均不少于70例。
應(yīng)包括至少50例由對比試劑任一基因確定為弱陽性的樣本(一般將任一基因的Ct值小于cutoff值3～5個Ct值的樣本定義為弱陽性樣本)，如涉及多種樣本類型，弱陽性樣本應(yīng)覆蓋每種樣本類型。
5. 對比方法
應(yīng)選擇質(zhì)量較好的已上市同類產(chǎn)品作為對比試劑，同時，將試驗體外診斷試劑的檢測結(jié)果與臨床參考標(biāo)準(zhǔn)結(jié)果進(jìn)行對比。應(yīng)根據(jù)國家衛(wèi)生健康委員會發(fā)布的《新型冠狀病毒肺炎診療方案》《新型冠狀病毒肺炎防控方案》及其他疾病的相關(guān)診療指南等，獲得病例的臨床參考標(biāo)準(zhǔn)結(jié)果。
試驗體外診斷試劑與對比試劑應(yīng)針對同一份樣本或同步采集的相同樣本類型的樣本（采樣順序應(yīng)隨機(jī)）進(jìn)行檢測。若尚無相同樣本類型的核酸檢測試劑批準(zhǔn)上市，也可選擇同源的、可比的樣本，進(jìn)行對比試劑的檢測。申請人應(yīng)對試驗體外診斷試劑與對比試劑的可比性進(jìn)行充分的論證。對于新的樣本類型，申請人還應(yīng)對新樣本類型的適用性及其與對比試劑檢測時所用同源樣本類型的可比性進(jìn)行充分論證。
6. 統(tǒng)計分析
6.1描述性統(tǒng)計分析
應(yīng)對入組人群進(jìn)行人口學(xué)分析，包括年齡、性別和臨床診斷背景信息等。
6.2與對比試劑的總體一致性統(tǒng)計分析
統(tǒng)計分析一般以2×2表的形式對結(jié)果進(jìn)行總結(jié)，并據(jù)此計算陰性符合率、陽性符合率、總符合率及其95%置信區(qū)間。
6.3與臨床參考標(biāo)準(zhǔn)（確診/排除）的總體統(tǒng)計分析
原則上，納入臨床試驗的所有病例均應(yīng)有新冠確診/排除結(jié)果。如少部分人群確無明確的臨床參考標(biāo)準(zhǔn)結(jié)果，可不納入該部分統(tǒng)計分析。所有具有臨床參考標(biāo)準(zhǔn)結(jié)果的病例，均應(yīng)納入該部分統(tǒng)計分析。針對新的樣本類型，應(yīng)特別關(guān)注試驗體外診斷試劑與臨床參考標(biāo)準(zhǔn)的對比結(jié)果，因此，應(yīng)盡量保證納入臨床試驗的病例有可溯源的新冠確診/排除結(jié)果，確保該部分統(tǒng)計具有充分的樣本量。
應(yīng)以病例為單位，進(jìn)行試驗體外診斷試劑與臨床參考標(biāo)準(zhǔn)（確診/排除）的總體統(tǒng)計分析。統(tǒng)計分析一般以2×2表的形式對結(jié)果進(jìn)行總結(jié)，并據(jù)此計算臨床靈敏度、臨床特異度及其95%置信區(qū)間。
7. 其他
7.1如試驗體外診斷試劑同時適用于快檢機(jī)型和常規(guī)機(jī)型，且經(jīng)臨床前驗證試驗體外診斷試劑在快檢機(jī)型與常規(guī)機(jī)型上的檢測性能沒有顯著差異，但在樣本提取純化或反應(yīng)體系等方面存在明顯差異，導(dǎo)致檢測時間上存在明顯差異的，建議以代表性快檢機(jī)型為主機(jī)型進(jìn)行臨床試驗，同時進(jìn)行一定數(shù)量的代表性快檢機(jī)型與代表性常規(guī)機(jī)型之間的比較研究。
7.2如試驗體外診斷試劑為包括新冠項目的多項聯(lián)檢試劑，應(yīng)考慮聯(lián)檢的臨床意義，確認(rèn)多項聯(lián)檢試劑具有相同的適用人群，采用相同的樣本類型。多項聯(lián)檢時，每個項目的檢測均應(yīng)滿足相應(yīng)指導(dǎo)原則的要求。每個項目均應(yīng)按照試驗體外診斷試劑和對比試劑產(chǎn)品說明書的要求進(jìn)行臨床試驗，如：樣本采集、保存液/采樣液/處理液和核酸提取純化試劑等的要求。
7.3如試驗體外診斷試劑包括不同樣本類型，針對每種樣本類型，可參考6.2和6.3的相關(guān)內(nèi)容，分別進(jìn)行統(tǒng)計分析。針對總體統(tǒng)計分析及樣本類型的分層統(tǒng)計分析，臨床試驗結(jié)果均應(yīng)滿足臨床使用需求。
7.4針對不一致結(jié)果，應(yīng)結(jié)合患者的流行病學(xué)背景、臨床癥狀和疾病轉(zhuǎn)歸等信息進(jìn)行充分的分析。
7.5此外，還應(yīng)關(guān)注并計算試驗體外診斷試劑的復(fù)測率。申請人應(yīng)結(jié)合臨床使用需求，嚴(yán)格控制復(fù)測率。
8. 境外臨床試驗數(shù)據(jù)的認(rèn)可
境外臨床試驗數(shù)據(jù)應(yīng)符合《接受醫(yī)療器械境外臨床試驗數(shù)據(jù)技術(shù)指導(dǎo)原則》和《使用體外診斷試劑境外臨床試驗數(shù)據(jù)的注冊審查指導(dǎo)原則》的相關(guān)要求。提交完整的臨床試驗方案、報告和倫理審查意見，以及該數(shù)據(jù)適用于中國患者人群的論證資料、境內(nèi)外臨床試驗質(zhì)量管理差異的對比資料和臨床試驗質(zhì)量管理差異對于臨床試驗結(jié)果影響的論證資料。
注冊申請人應(yīng)根據(jù)上述臨床試驗技術(shù)審評要求，論證境外臨床試驗數(shù)據(jù)的充分性。
9. 臨床評價資料的形式要求
申請人應(yīng)按照《體外診斷試劑注冊與備案管理辦法》《關(guān)于公布體外診斷試劑注冊申報資料要求和批準(zhǔn)證明文件格式的公告》《體外診斷試劑臨床試驗技術(shù)指導(dǎo)原則》及《體外診斷試劑臨床試驗數(shù)據(jù)遞交要求注冊審查指導(dǎo)原則》等法規(guī)文件要求提交臨床評價綜述、各機(jī)構(gòu)倫理審查意見、臨床試驗方案、臨床試驗小結(jié)、臨床試驗報告及臨床試驗數(shù)據(jù)庫等。
臨床試驗數(shù)據(jù)表作為臨床試驗小結(jié)的附件提交。數(shù)據(jù)表應(yīng)包括唯一可追溯的樣本編號、年齡、性別、樣本類型、受試者臨床診斷背景信息、新冠確診/排除結(jié)果、試驗體外診斷試劑的檢測結(jié)果和對比試劑的檢測結(jié)果（如：各基因和內(nèi)標(biāo)的Ct值）等。具體內(nèi)容詳見附表。
其中，受試者臨床診斷背景信息應(yīng)盡量明確各病例的體征、癥狀、流行病學(xué)史、影像學(xué)檢測結(jié)果、白細(xì)胞數(shù)和淋巴細(xì)胞數(shù)、臨床診療過程中所有新冠病毒核酸的檢測時間和結(jié)果等，以證明受試者為新冠疑似病例或其他需檢測人群。對于出院排除病例，還應(yīng)明確該病例的確診入院時間和出院時間等，應(yīng)滿足診療方案中有關(guān)出院排除的相關(guān)要求。
應(yīng)在各臨床試驗機(jī)構(gòu)隨機(jī)選擇至少50個樣本（包括強(qiáng)陽、中陽和所有弱陽性樣本），提交試驗體外診斷試劑與對比試劑的檢測圖譜。
（五）產(chǎn)品說明書和標(biāo)簽樣稿
產(chǎn)品說明書格式應(yīng)滿足《體外診斷試劑說明書編寫指導(dǎo)原則》的要求。產(chǎn)品說明書中技術(shù)內(nèi)容應(yīng)與注冊申報資料中的相關(guān)研究結(jié)果保持一致，如某些內(nèi)容引用自參考文獻(xiàn)，應(yīng)以規(guī)范格式進(jìn)行標(biāo)注，并單獨列明文獻(xiàn)的相關(guān)信息。新冠病毒核酸檢測試劑說明書編寫應(yīng)重點關(guān)注以下內(nèi)容。
1．【預(yù)期用途】
本試劑盒用于體外定性檢測新型冠狀病毒肺炎疑似病例、其他需要進(jìn)行新型冠狀病毒感染診斷或鑒別診斷者的xx樣本中，新型冠狀病毒（2019-nCoV）xx基因。
有關(guān)“疑似病例”等人群的定義參照《新型冠狀病毒肺炎診療方案》《新型冠狀病毒肺炎防控方案》等文件執(zhí)行。
該產(chǎn)品在使用上應(yīng)當(dāng)遵守《新型冠狀病毒肺炎診療方案》《新型冠狀病毒肺炎防控方案》等文件的相關(guān)要求。
開展新型冠狀病毒核酸檢測，應(yīng)符合《新冠病毒樣本采集和檢測技術(shù)指南》等的要求，做好生物安全工作。
本試劑盒檢測結(jié)果僅供臨床參考，不得作為臨床診斷的唯一標(biāo)準(zhǔn)。建議結(jié)合患者臨床表現(xiàn)和其他實驗室檢測對病情進(jìn)行綜合分析。
2.【檢驗原理】
簡述產(chǎn)品的核酸提取和RT-PCR原理。明確內(nèi)標(biāo)基因名稱及其作用。如采用了防污染措施，進(jìn)行簡要描述。
3.【主要組成成分】
明確試劑盒中各組分及具體成分。明確需要但未提供的材料，例如核酸提取試劑，病毒保存液，痰液消化液等的產(chǎn)品名稱，生產(chǎn)廠家，貨號及注冊證號、備案號等信息。
4.【樣本要求】
需詳細(xì)描述樣本采集和處理方式，包括采樣步驟，適用的拭子材質(zhì)，保存液、消化液的使用體積，滅活方式等。描述樣本及核酸提取液的保存穩(wěn)定性。
5.【檢驗方法】
明確核酸提取用的樣本體積、洗脫體積和PCR加樣體積，陰、陽性質(zhì)控品與待測樣本同步進(jìn)行核酸提取操作。明確各適用機(jī)型的反應(yīng)參數(shù)設(shè)置。明確質(zhì)控品和內(nèi)標(biāo)的檢測結(jié)果Ct值范圍，作為實驗有效性的標(biāo)準(zhǔn)。
6.【檢驗結(jié)果的解釋】
通過擴(kuò)增曲線和Ct值進(jìn)行結(jié)果陰陽性的判斷，列明結(jié)果陰性、陽性、復(fù)測、無效等所有情形。
7.【檢驗方法的局限性】
7.1本試劑盒的檢測結(jié)果僅供臨床參考，對患者的臨床診治應(yīng)結(jié)合其癥狀/體征、病史、其他實驗室檢查及治療反應(yīng)等情況綜合考慮。
7.2有關(guān)假陽性結(jié)果的可能性分析
7.2.1 如果樣本在運輸、處理過程中發(fā)生交叉污染，則可能導(dǎo)致假陽性結(jié)果；
7.2.2 實驗環(huán)境有PCR產(chǎn)物等氣溶膠污染，則可能導(dǎo)致假陽性結(jié)果；
7.2.3 實驗過程中使用的耗材、設(shè)備等受污染，則可能導(dǎo)致假陽性結(jié)果。
7.3有關(guān)假陰性結(jié)果的可能性分析
7.3.1不合理的樣本采集、轉(zhuǎn)運、儲存及處理、樣本中病原體含量過低均有可能導(dǎo)致假陰性結(jié)果；
7.3.2該病原體待測靶序列的變異或其他原因?qū)е碌男蛄懈淖兛赡軙?dǎo)致假陰性結(jié)果；
7.3.3 未經(jīng)驗證的其他干擾或PCR抑制因子等可能會導(dǎo)致假陰性結(jié)果。
8.【產(chǎn)品性能指標(biāo)】
簡述以下性能指標(biāo)：
8.1國家標(biāo)準(zhǔn)品和企業(yè)參考品的符合率。
8.2檢出限：簡要介紹評價方法、所用樣本情況以及評價結(jié)果。
8.3對包容性的研究情況進(jìn)行總結(jié)。描述新冠病毒變異株對產(chǎn)品檢測結(jié)果的影響，例如影響產(chǎn)品的檢出限或者導(dǎo)致單基因檢測陽性等。
8.4對精密度的研究情況進(jìn)行總結(jié)。
8.5分析特異性
8.5.1交叉反應(yīng)：詳述交叉反應(yīng)驗證的病原體種類，及有/無交叉反應(yīng)的濃度水平。
8.5.2干擾試驗：說明驗證的干擾物質(zhì)種類及有/無干擾反應(yīng)的濃度水平。
8.6臨床試驗：簡要介紹試驗方法、受試者及樣本、試驗結(jié)果和結(jié)論等。
9.【注意事項】
9.1臨床實驗室應(yīng)嚴(yán)格按照《醫(yī)療機(jī)構(gòu)臨床基因擴(kuò)增實驗室管理辦法》等有關(guān)分子生物學(xué)實驗室要求及《醫(yī)療機(jī)構(gòu)新型冠狀病毒核酸檢測工作手冊》（試行第二版）執(zhí)行。
9.2試劑保存運輸及使用過程中多種因素可能導(dǎo)致性能變化，如保存運輸不當(dāng)、樣本采集、樣本處理及檢測過程操作不規(guī)范等，請嚴(yán)格按照說明書操作。因拭子等樣本采集過程及病毒感染過程本身的特點，可能存在采集到的樣本量不足等原因帶來的假陰性結(jié)果，應(yīng)結(jié)合臨床其他診療信息綜合判斷，必要時復(fù)測。
9.3生物安全防護(hù)相關(guān)內(nèi)容
9.4避免實驗室污染的措施
三、參考文獻(xiàn)
1.《體外診斷試劑注冊與備案管理辦法》（國家市場監(jiān)督管理總局令第48號）[Z].
2.《關(guān)于公布體外診斷試劑注冊申報資料要求和批準(zhǔn)證明文件格式的公告》（國家藥品監(jiān)督管理局公告2021年第122號）[Z].
3. 中華人民共和國衛(wèi)生健康委員會. 新型冠狀病毒感染的肺炎診療方案(試行第九版) [Z]. 2022-03-15.
4. 中華人民共和國衛(wèi)生健康委員會.新型冠狀病毒肺炎防控方案（第八版）[Z].2021-05-14.
附件2?
新型冠狀病毒（2019-nCoV）抗體檢測試劑注冊審查指導(dǎo)原則
本指導(dǎo)原則旨在指導(dǎo)注冊申請人對新型冠狀病毒（2019-nCoV）抗體檢測試劑注冊申報資料的準(zhǔn)備及撰寫，同時也為技術(shù)審評部門提供參考。
本指導(dǎo)原則是對新型冠狀病毒（2019-nCoV）抗體檢測試劑的一般要求，注冊申請人應(yīng)依據(jù)產(chǎn)品的具體特性確定其中內(nèi)容是否適用。若不適用，需具體闡述理由及相應(yīng)的科學(xué)依據(jù)，并依據(jù)產(chǎn)品的具體特性對注冊申報資料的內(nèi)容進(jìn)行充實和細(xì)化。
本指導(dǎo)原則是供注冊申請人和技術(shù)審評人員使用的指導(dǎo)性文件，但不包括審評審批所涉及的行政事項，亦不作為法規(guī)強(qiáng)制執(zhí)行，應(yīng)在遵循相關(guān)法規(guī)的前提下使用本指導(dǎo)原則。如果有能夠滿足相關(guān)法規(guī)要求的其他方法，也可以采用，但是需要提供詳細(xì)的研究資料和驗證資料。
本指導(dǎo)原則是在現(xiàn)行法規(guī)和標(biāo)準(zhǔn)體系以及當(dāng)前認(rèn)知水平下制定，隨著法規(guī)和標(biāo)準(zhǔn)的不斷完善，以及科學(xué)技術(shù)的不斷發(fā)展，相關(guān)內(nèi)容也將適時進(jìn)行調(diào)整。
一、適用范圍
新型冠狀病毒（2019-nCoV）（以下簡稱“新冠病毒”）屬于β屬的冠狀病毒，有包膜，顆粒呈圓形或橢圓形，直徑60-140nm。具有5個必需基因，分別針對核蛋白（N）、病毒包膜（E）、基質(zhì)蛋白（M）和刺突蛋白（S）四種結(jié)構(gòu)蛋白及RNA依賴性的RNA聚合酶（RdRp）。核蛋白（N）包裹RNA基因組構(gòu)成核衣殼，外面圍繞著病毒包膜（E），病毒包膜包埋有基質(zhì)蛋白（M）和刺突蛋白（S）等蛋白。
新冠病毒侵入人體后，人體會產(chǎn)生相應(yīng)的特異性抗體進(jìn)行防御。其中特異性抗體IgM最早產(chǎn)生并進(jìn)行早期防御，但該抗體維持時間短，消失快，在血中持續(xù)數(shù)日至數(shù)周；隨后產(chǎn)生IgG抗體，在IgM接近消失時，IgG的含量達(dá)到高峰，并在血中持續(xù)較長時間。在臨床應(yīng)用中，因新冠病毒特異性IgG在病毒感染早期檢出率較低，因此該標(biāo)志物不單獨用于新冠病毒感染的輔助診斷，應(yīng)與新冠病毒特異性IgM抗體檢測聯(lián)合使用。
新冠病毒疫苗的接種會刺激人體產(chǎn)生保護(hù)性抗體，隨著大規(guī)模人群新冠病毒疫苗接種率的提高，在新冠病毒血清學(xué)檢測過程中，應(yīng)充分考慮疫苗接種對檢測結(jié)果的影響，新型冠狀病毒肺炎診療方案提出，新冠病毒特異性IgM檢測不適用于近期接種過新冠病毒疫苗的人群。同時，新冠病毒疫苗接種后抗體持續(xù)陽性的時間尚未有明確的研究結(jié)論，新冠病毒特異性IgG檢測亦不適用于接種過新冠病毒疫苗或曾經(jīng)感染過新冠病毒的人群。在新冠病毒抗體臨床應(yīng)用上，我國《新冠病毒疫苗接種技術(shù)指南》明確規(guī)定，接種后不建議常規(guī)檢測抗體作為免疫成功與否的依據(jù)。
本指導(dǎo)原則適用的新冠病毒抗體檢測試劑預(yù)期用途為體外定性檢測人體血清、血漿、全血等樣本中新冠病毒特異性IgM抗體/IgG抗體/總抗體。預(yù)期適用人群如下：新冠病毒特異性IgM抗體檢測預(yù)期適用于近期（六個月以內(nèi)）未接種過新冠病毒疫苗或未感染過新冠病毒的新型冠狀病毒感染肺炎的疑似病例；新冠病毒特異性IgM抗體/IgG抗體聯(lián)合檢測、總抗體檢測預(yù)期適用于未接種過新冠病毒疫苗及既往未感染過新冠病毒的的疑似病例。申報產(chǎn)品僅用作對新型冠狀病毒核酸檢測陰性疑似病例的補(bǔ)充檢測指標(biāo)或疑似病例診斷中與核酸檢測協(xié)同使用，不能作為新型冠狀病毒感染的肺炎確診和排除的依據(jù)，不適用于一般人群的篩查。本指導(dǎo)原則不適用于檢測新冠病毒IgA抗體以及中和抗體相關(guān)產(chǎn)品。
本指導(dǎo)原則適用于新冠病毒抗體檢測試劑注冊申請和變更注冊申請的情形。本指導(dǎo)原則針對新冠病毒抗體檢測試劑注冊申報資料中的部分內(nèi)容進(jìn)行撰寫，其他未盡事宜應(yīng)當(dāng)符合《關(guān)于公布體外診斷試劑注冊申報資料要求和批準(zhǔn)證明文件格式的公告》（國家藥品監(jiān)督管理局公告2021年第122號）等相關(guān)法規(guī)要求。
二、注冊審查要點
（一）監(jiān)管信息
1. 產(chǎn)品名稱及分類編碼
產(chǎn)品名稱應(yīng)符合《體外診斷試劑注冊與備案管理辦法》（國家市場監(jiān)督管理總局令第48號）及相關(guān)法規(guī)的要求，如新型冠狀病毒（2019-nCoV）抗體檢測試劑盒（膠體金法）。根據(jù)《體外診斷試劑分類規(guī)則》，該產(chǎn)品按照第三類體外診斷試劑管理，分類編碼為6840。
2. 其他信息還包括產(chǎn)品列表、關(guān)聯(lián)文件、申報前與監(jiān)管機(jī)構(gòu)的聯(lián)系情況和溝通記錄以及符合性聲明等文件。
（二）綜述資料
綜述資料主要包括概述、產(chǎn)品描述、預(yù)期用途、申報產(chǎn)品上市歷史及其他需說明的內(nèi)容。其中，產(chǎn)品描述中應(yīng)詳述檢測原理、產(chǎn)品主要研究結(jié)果的總結(jié)和評價、與同類和/或前代產(chǎn)品的比較等。與同類和/或前代產(chǎn)品的比較，應(yīng)著重從方法學(xué)、檢驗原理、產(chǎn)品主要性能等方面詳細(xì)說明申報產(chǎn)品與目前市場上已獲批同類產(chǎn)品之間的主要區(qū)別。
（三）非臨床資料
1. 產(chǎn)品技術(shù)要求及檢驗報告
1.1 產(chǎn)品技術(shù)要求
注冊申請人應(yīng)當(dāng)在原材料質(zhì)量和生產(chǎn)工藝穩(wěn)定的前提下，根據(jù)產(chǎn)品研制、前期評價等結(jié)果，依據(jù)國家標(biāo)準(zhǔn)、行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)及有關(guān)文獻(xiàn)資料，結(jié)合產(chǎn)品特性按照《醫(yī)療器械產(chǎn)品技術(shù)要求編寫指導(dǎo)原則》（2022年第8號）的要求編寫。該類產(chǎn)品作為第三類體外診斷試劑，應(yīng)當(dāng)以附錄形式明確主要原材料以及生產(chǎn)工藝要求。
新型冠狀病毒IgM、IgG檢測試劑目前都發(fā)布了相應(yīng)的國家標(biāo)準(zhǔn)品，技術(shù)要求中應(yīng)體現(xiàn)國家標(biāo)準(zhǔn)品的相關(guān)要求，并使用國家標(biāo)準(zhǔn)品對三批產(chǎn)品進(jìn)行檢驗。
如有適用的國家標(biāo)準(zhǔn)、行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)，產(chǎn)品技術(shù)要求的相關(guān)要求應(yīng)不低于相應(yīng)的要求。
1.2 產(chǎn)品檢驗報告
新冠病毒抗體檢測試劑已有國家標(biāo)準(zhǔn)品，技術(shù)要求中應(yīng)體現(xiàn)國家標(biāo)準(zhǔn)品的相關(guān)要求，并使用國家標(biāo)準(zhǔn)品對三批產(chǎn)品進(jìn)行檢驗。
2. 分析性能研究
注冊申請人應(yīng)采用在符合質(zhì)量管理體系的環(huán)境下生產(chǎn)的試劑盒進(jìn)行所有分析性能研究，提交具體研究方法、試驗方案、試驗數(shù)據(jù)、統(tǒng)計分析等詳細(xì)資料。
如申報產(chǎn)品適用不同的機(jī)型，需要提交采用不同機(jī)型進(jìn)行性能評估的資料。如申報產(chǎn)品包含不同的包裝規(guī)格，需要對各包裝規(guī)格進(jìn)行分析或驗證。
適用的不同樣本類型應(yīng)分別進(jìn)行分析性能研究。
分析性能評估所用樣本的基本信息均需明確，例如樣本來源、樣本類型、采集和處理方式、稀釋方式、定值過程及數(shù)據(jù)等。研究中采用的新冠病毒陽性樣本，應(yīng)采用科學(xué)合理的方法確定其陰陽性和濃度水平，提交具體的試驗資料。分析性能評估用樣本一般應(yīng)為真實樣本，如涉及稀釋后檢測，應(yīng)采用與適用樣本類型一致的陰性基質(zhì)。對于各項性能中采用的樣本，在下述各項性能研究資料中分別提供樣本信息列表。
2.1樣本穩(wěn)定性
樣本穩(wěn)定性研究應(yīng)采用臨床真實樣本進(jìn)行，通常應(yīng)當(dāng)至少包含一定數(shù)量陰性樣本、弱陽性樣本及陽性樣本，考察樣本在經(jīng)歷不同的儲存條件后，試劑能否穩(wěn)定輸出符合要求的結(jié)果。樣本穩(wěn)定性可以包含樣本凍融穩(wěn)定性和運輸穩(wěn)定性的研究，以及樣本經(jīng)過處理后（如滅活）穩(wěn)定性的研究。
2.2適用的樣本類型
描述適用的樣本類型，如：血清、血漿或全血等，血漿和全血需考察不同抗凝劑的適用性。
如產(chǎn)品適用于血清和血漿，可采用同源比對驗證樣本的可比性。
如產(chǎn)品適用于全血，可采用該樣本類型進(jìn)行全性能評估，亦可至少進(jìn)行檢出限、不同區(qū)域病毒樣本的包容性和精密度研究，同時進(jìn)行同源比對試驗。
研究樣本采集時間點的選擇：是否受病程、臨床癥狀、用藥情況等因素的影響。
2.3校準(zhǔn)品的量值溯源和質(zhì)控品的賦值
描述校準(zhǔn)品的的量值溯源（如適用）。
描述質(zhì)控品的賦值（如適用）。需至少進(jìn)行三批產(chǎn)品分別在不同適用機(jī)型的賦值研究。
2.4精密度
應(yīng)對精密度指標(biāo)，如標(biāo)準(zhǔn)差或變異系數(shù)等的評價標(biāo)準(zhǔn)做出合理要求。精密度研究應(yīng)采用臨床樣本。
應(yīng)考慮運行、時間、操作者、儀器、試劑批次和地點等影響精密度的條件，設(shè)計合理的精密度試驗方案進(jìn)行評價。
設(shè)定合理的精密度評價周期，例如：為期至少20天的檢測，具體方案可參考性能評價相關(guān)文件進(jìn)行。
用于精密度評價的臨床樣本應(yīng)至少包含4個水平：陰性樣本、臨界陽性樣本、（中和強(qiáng)）陽性樣本，并根據(jù)產(chǎn)品特性設(shè)定適當(dāng)?shù)木芏纫蟆?/span>
陰性樣本：待測物濃度低于檢出限或為零濃度，陰性檢出率應(yīng)為100%（n≥20）。
臨界陽性樣本：待測物濃度略高于試劑盒的檢出限，陽性檢出率應(yīng)≥95%（n≥20）。
中陽性樣本：待測物濃度呈中等陽性，陽性檢出率為100%且CV≤15%（n≥20）。
強(qiáng)陽性樣本：待測物濃度呈強(qiáng)陽性，陽性檢出率為100%且CV≤15%（n≥20）。
2.5包容性
提供具有時間和區(qū)域特征性的不同來源的患者真實臨床樣本進(jìn)行驗證。IgM抗體、IgG抗體檢測試劑分別研究各10個不同患者樣本，驗證內(nèi)容應(yīng)包括檢出限、重復(fù)性等，提供樣本及濃度的確認(rèn)方法、試驗數(shù)據(jù)。其中應(yīng)注意，包容性研究樣本和檢出限研究樣本不能重復(fù)。
2.6檢出限
檢出限的確定：建議選取特定滴度的特異性抗體陽性樣本梯度稀釋進(jìn)行檢出限確定，每個梯度的稀釋液重復(fù)3～5份，每份稀釋液重復(fù)檢測不少于20次，將具有95%陽性檢出率的抗體水平作為檢出限。
IgM抗體、IgG抗體應(yīng)分別選擇不同來源具有代表性的5個臨床樣本進(jìn)行檢出限的確定。
檢出限的驗證：選擇具有時間和區(qū)域特征性的至少5個臨床樣本（與檢出限確定不同樣本）在檢出限濃度水平進(jìn)行驗證，應(yīng)達(dá)到95%陽性檢出率。
采用的稀釋液應(yīng)與適用樣本類型的基質(zhì)一致，可采用陰性樣本進(jìn)行稀釋?？贵w檢測試劑應(yīng)提供詳細(xì)的抗體類型和滴度的確認(rèn)方法及驗證結(jié)果。
2.7分析特異性
2.7.1交叉反應(yīng)驗證（IgM抗體、IgG抗體檢測試劑應(yīng)分別驗證）
地方性人類冠狀病毒（HKU1，OC43，NL63和229E）。
H1N1（新型甲型H1N1流感病毒（2009）、季節(jié)性H1N1流感病毒）、H3N2、H5N1、H7N9，乙型流感Yamagata、Victoria，呼吸道合胞病毒，鼻病毒A、B、C組，腺病毒1、2、3、4、5、7、55型，腸病毒A、B、C、D組，EB病毒、麻疹病毒、人巨細(xì)胞病毒、輪狀病毒、諾如病毒、腮腺炎病毒、水痘-帶狀皰疹病毒。
肺炎支原體。
高濃度新型冠狀病毒特異性IgG抗體與特異性IgM抗體的交叉反應(yīng)驗證。
驗證不少于20份正常人樣本。
提供所有用于交叉反應(yīng)驗證的病原體抗體陽性樣本的來源、和濃度/滴度確認(rèn)等詳細(xì)的試驗資料。
2.7.2內(nèi)源/外源物質(zhì)干擾：
不同樣本類型其潛在干擾物質(zhì)可能不同，應(yīng)根據(jù)具體采集的樣本類型，選擇適用的干擾物質(zhì)進(jìn)行研究。建議申請人在每種干擾物質(zhì)的潛在最大濃度（“最差條件”）條件下進(jìn)行評價，在病毒抗體臨界陽性水平進(jìn)行干擾試驗驗證。?
表 用于干擾試驗的物質(zhì)
2.8 高劑量鉤狀效應(yīng)?
申請人應(yīng)評估高劑量鉤狀效應(yīng)并提交研究資料。
2.9 IgM抗體破壞試驗（IgM抗體檢測試劑適用）：對至少5份含有病原體特異性IgM抗體的樣本進(jìn)行IgM破壞試驗研究，方法為采用特定的化學(xué)制劑（如2－巰基乙醇或二硫蘇糖醇）處理樣本后，重新進(jìn)行檢測，IgM檢測結(jié)果應(yīng)為陰性。
2.10企業(yè)參考品性能：根據(jù)主要原材料研究資料中的企業(yè)參考品設(shè)置情況，采用三批產(chǎn)品對企業(yè)參考品進(jìn)行檢驗并提供詳細(xì)的試驗數(shù)據(jù)。
2.11反應(yīng)體系研究
2.11.1研究樣本采集時間點的選擇：是否受病程、臨床癥狀、用藥情況等因素的影響。
2.11.2反應(yīng)條件確定
申請人應(yīng)考慮反應(yīng)時間、判讀時間、反應(yīng)溫度/濕度、洗滌液體積和洗滌次數(shù)（如涉及）等條件對產(chǎn)品性能的影響，通過試驗確定上述條件的最佳組合。
2.11.3反應(yīng)體系中樣品加樣方式及加樣量確定：通過試驗確定最佳的加樣方式及加樣量。如樣本需采取稀釋或其他必要的方法進(jìn)行處理后方可用于最終檢測，申請人還應(yīng)對樣本稀釋液及其用量、其他必要的處理方法等進(jìn)行研究。對于IgM抗體檢測試劑，如采用間接法，建議考慮高濃度特異性IgG對結(jié)果的影響，合理設(shè)置IgG去除相關(guān)樣本處理步驟，以降低特異性IgG可能造成的假陰性和假陽性。
應(yīng)對樣本是否可以滅活，以及可采用的滅活方式、滅活時間進(jìn)行研究確定。
3. 穩(wěn)定性研究
一般應(yīng)包含研究方案，采用的樣本、儀器和試劑信息，數(shù)據(jù)（如檢驗結(jié)果、溫度記錄等）及試驗結(jié)果等。
3.1實時穩(wěn)定性（貨架有效期）
提交至少三批申報產(chǎn)品在實際儲存條件下保存至成品有效期后的實時穩(wěn)定性研究資料。明確儲存的環(huán)境條件（如溫度、濕度和光照）及有效期。
3.2使用穩(wěn)定性
提交申報產(chǎn)品實際使用期間穩(wěn)定性的研究資料，應(yīng)包括所有組成成分的開封穩(wěn)定性。適用時提交復(fù)溶穩(wěn)定性、機(jī)載穩(wěn)定性及凍融次數(shù)研究資料等。如涉及校準(zhǔn)品，還應(yīng)提交校準(zhǔn)頻率或校準(zhǔn)穩(wěn)定性研究資料。明確產(chǎn)品使用的溫度、濕度條件等。
3.3運輸穩(wěn)定性
提交申報產(chǎn)品可在特定或者預(yù)期的條件下運輸?shù)难芯抠Y料，應(yīng)說明產(chǎn)品正確運輸?shù)沫h(huán)境條件（如溫度、濕度、光照和機(jī)械保護(hù)等）。同時說明產(chǎn)品的包裝方式以及暴露的最差運輸條件。注意應(yīng)考察經(jīng)過運輸條件后實時穩(wěn)定性。
4. 陽性判斷值研究
陽性判斷值的確定：提交對申報試劑陰性/灰區(qū)/陽性等結(jié)果判斷的陽性判斷值（cut-off，CO）確定的研究資料，包括具體的試驗方案、人群樣本選擇、評價標(biāo)準(zhǔn)、統(tǒng)計學(xué)分析和研究數(shù)據(jù)等。確定陽性判斷值使用的樣本來源的選擇應(yīng)考慮到不同的地理區(qū)域、不同的感染階段和生理狀態(tài)等因素的影響。
如適用,可采用受試者工作特征曲線（receiver operating characteristic curve, ROC）的分析方式來選擇確定合理的陽性判斷值；如結(jié)果存在灰區(qū)（equivocal zone），應(yīng)明確灰區(qū)建立的基礎(chǔ)。應(yīng)重點考察對弱陽性樣本的區(qū)分能力，研究中應(yīng)包含有統(tǒng)計學(xué)意義的弱陽性樣本例數(shù)。
如采用其他方法對陽性判斷值進(jìn)行確認(rèn)研究，應(yīng)說明這種方法的合理性。
陽性判斷值的驗證：應(yīng)搜集采用分布均勻的真實樣本對所確定的陽性判斷值進(jìn)行驗證。
提交陽性判斷值所用樣本信息列表，至少包括性別、年齡、種族、臨床診斷信息、樣本來源機(jī)構(gòu)、抗體檢測結(jié)果等。注意，陽性判斷值的驗證樣本不應(yīng)與陽性判斷值的確定樣本以及臨床試驗樣本重復(fù)。
如果產(chǎn)品適用不同樣本類型，需要對所有樣本類型進(jìn)行陽性判斷值的驗證。
5.其他資料
5.1主要原材料研究資料
此產(chǎn)品的主要原材料包括抗原、抗體、質(zhì)控品、參考品等。應(yīng)提供主要原材料的選擇與來源、制備過程、質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)等相關(guān)研究資料。如主要原材料為企業(yè)自制，應(yīng)提供其詳細(xì)制備過程；如主要原材料源于外購，應(yīng)提供資料包括：選擇該原材料的依據(jù)及對比篩選試驗資料、供應(yīng)商提供的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)、出廠檢驗報告，以及該原材料到貨后的質(zhì)量檢驗資料，供應(yīng)商應(yīng)固定，不得隨意更換。
5.1.1新型冠狀病毒特異的抗原、抗體
病原體特異的抗原、抗體是該類產(chǎn)品的關(guān)鍵原材料。由于新型冠狀病毒不同地域、不同人群感染的毒株之間存在的差異尚未明確，因此在選擇抗原、抗體原料時，應(yīng)注重抗原表位的選擇，避免毒株間差異造成的假陰性，亦應(yīng)考慮抗原在其他冠狀病毒的表達(dá)情況，避免存在交叉反應(yīng)出現(xiàn)假陽性。抗原、抗體原材料研究資料中應(yīng)詳述該方面的考慮。
5.1.1.1新型冠狀病毒抗體檢測試劑所用特異性抗原
首先應(yīng)詳述抗原表位及選擇依據(jù)，此外應(yīng)提交抗原來源、制備、篩選、純化、鑒定及質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)（外觀、蛋白濃度、純度、分子量、功能性試驗等）詳細(xì)試驗資料。
主要包括以下兩種情況：
5.1.1.1.1企業(yè)自制抗原
如為天然抗原，則應(yīng)對毒株選擇、培養(yǎng)、抗原提取、純化、鑒定等試驗過程予以詳述。如為重組抗原，則應(yīng)提交有關(guān)特定基因選擇、序列信息、克隆構(gòu)建及轉(zhuǎn)化、抗原表達(dá)及純化、鑒定等詳細(xì)資料，重組抗原應(yīng)明確與天然抗原結(jié)構(gòu)的異同。
5.1.1.1.2企業(yè)外購抗原
應(yīng)詳述抗原的名稱、抗原生物學(xué)來源、供應(yīng)商名稱、提交供應(yīng)商選擇的研究資料及供應(yīng)商出具的抗原性能指標(biāo)及檢驗報告。重組抗原應(yīng)描述關(guān)特定基因選擇、序列信息，克隆構(gòu)建及轉(zhuǎn)化，抗原表達(dá)及純化、鑒定等資料，重組抗原應(yīng)明確與天然抗原結(jié)構(gòu)的異同。
5.1.1.2其他主要原材料
除上述主要原材料外，產(chǎn)品中包含的其他主要原材料，如小鼠抗人IgM/IgG單克隆抗體、酶標(biāo)抗體、膠體金、硝酸纖維素膜、微孔板、樣本稀釋液等，均應(yīng)進(jìn)行選擇及驗證，并提交相關(guān)資料。明確主要原材料的供應(yīng)商和質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)。免疫層析方法學(xué)的產(chǎn)品如適用于全血，應(yīng)介紹血細(xì)胞去除方式，并驗證去除效果。
5.1.2試劑盒質(zhì)控品/質(zhì)控線
產(chǎn)品應(yīng)設(shè)置合理的質(zhì)控品/質(zhì)控線。質(zhì)控品應(yīng)至少包含陰性和陽性兩個水平?？贵w檢測試劑陽性質(zhì)控品可選擇臨床陽性樣本，陰性質(zhì)控品可選擇臨床陰性樣本或陰性基質(zhì)等。提交相關(guān)原料的來源、選擇和性能確認(rèn)等相關(guān)研究資料，明確供應(yīng)商和質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)。企業(yè)應(yīng)對質(zhì)控品的檢測結(jié)果（如A值）做出明確的范圍要求（試驗有效性的判斷）。
5.1.3企業(yè)參考品
該類產(chǎn)品的企業(yè)參考品一般包括陽性參考品、陰性參考品、檢出限參考品和重復(fù)性參考品。應(yīng)根據(jù)產(chǎn)品性能驗證的實際需要設(shè)置企業(yè)參考品。
應(yīng)提交企業(yè)參考品的原料來源、選擇、制備、陰陽性及濃度/滴度確認(rèn)方法或試劑等相關(guān)驗證資料。企業(yè)參考品的基質(zhì)應(yīng)與待測樣本相同。新型冠狀病毒抗體檢測試劑的企業(yè)參考品的設(shè)置建議如下：
5.1.3.1陽性參考品
陽性參考品應(yīng)考慮覆蓋不同來源及特征的新型冠狀病毒感染樣本，可選擇至少各5份確認(rèn)為陽性的臨床樣本，并設(shè)置不同滴度水平。
5.1.3.2陰性參考品
陰性參考品應(yīng)考慮檢測特異性的評價，應(yīng)納入正常臨床樣本、含類風(fēng)濕因子等干擾因素的樣本及其他病原體特異性抗體、抗原陽性樣本，建議包括冠狀病毒（HKU1、OC43、NL63、229E）、流感病毒、腸道病毒、呼吸道合胞病毒、腺病毒等抗體陽性樣本。
5.1.3.3檢出限參考品
可設(shè)置臨床陽性樣本的系列稀釋樣本，其中應(yīng)包含檢出限水平。
5.1.3.4重復(fù)性參考品
建議包括高、低兩個濃度的臨床樣本，其中一個濃度應(yīng)為檢出限附近的濃度。
5.2生產(chǎn)工藝研究資料
5.2.1產(chǎn)品基本反應(yīng)原理介紹。
5.2.2生產(chǎn)工藝介紹，可用流程圖方式表示，并提交研究資料說明每一步驟生產(chǎn)工藝的研究確定資料。
5.2.3包被/標(biāo)記工藝研究，申請人應(yīng)考慮如包被/標(biāo)記液量、濃度、時間、條件等指標(biāo)對產(chǎn)品性能的影響，通過試驗確定上述指標(biāo)的最佳組合。
5.2.4顯色系統(tǒng)、酶作用底物等的介紹以及最適條件研究。
（四）臨床評價資料
該類試劑應(yīng)通過臨床試驗路徑進(jìn)行臨床評價。臨床試驗應(yīng)滿足《體外診斷試劑臨床試驗技術(shù)指導(dǎo)原則》（國家藥品監(jiān)督管理局通告2021年第72號）的要求，如相關(guān)法規(guī)、文件有更新，臨床試驗應(yīng)符合更新后的要求。下面僅說明該類產(chǎn)品臨床試驗中應(yīng)關(guān)注的重點問題。
新冠病毒抗體檢測試劑臨床試驗應(yīng)按要求在三家以上臨床試驗機(jī)構(gòu)進(jìn)行，開展臨床試驗的機(jī)構(gòu)應(yīng)按要求經(jīng)國家藥品監(jiān)督管理局醫(yī)療器械臨床試驗機(jī)構(gòu)備案系統(tǒng)備案。采用試驗體外診斷試劑與已上市同類產(chǎn)品或臨床參考標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行比較研究，從而對產(chǎn)品臨床性能進(jìn)行確認(rèn)。
1. 臨床試驗設(shè)計
新冠病毒抗體檢測試劑臨床試驗設(shè)計與產(chǎn)品預(yù)期用途相關(guān)，該類產(chǎn)品預(yù)期用途一般為新冠病毒感染肺炎的輔助診斷，臨床試驗為觀察性研究。臨床試驗中可選擇與已上市同類產(chǎn)品進(jìn)行臨床檢測結(jié)果的一致性比對，或與臨床參考標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行比較研究。
如臨床試驗選擇試驗體外診斷試劑與已上市同類產(chǎn)品進(jìn)行一致性比對，在同類產(chǎn)品選擇的過程中應(yīng)注意產(chǎn)品適用樣本類型、檢測方法學(xué)、檢測性能等方面應(yīng)與試驗體外診斷試劑具有較好的可比性。
如臨床試驗選擇與臨床參考標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行比較研究，則臨床試驗中應(yīng)選擇臨床上新型冠狀病毒感染的肺炎診斷標(biāo)準(zhǔn)及疾病進(jìn)程的判定結(jié)果作為對比。國家衛(wèi)生健康委員會發(fā)布的《新型冠狀病毒感染的肺炎診療方案》等文件明確了新型冠狀病毒感染的肺炎診斷標(biāo)準(zhǔn)，臨床試驗中關(guān)于病例的確診與排除應(yīng)能夠滿足上述診療方案要求。建議同時參考診斷所用核酸檢測結(jié)果，以利于抗體檢測試劑臨床性能的充分評價。
2. 受試者選擇
臨床試驗的入組人群應(yīng)為產(chǎn)品的預(yù)期適用人群，新冠病毒特異性IgM抗體檢測預(yù)期適用于近期（六個月以內(nèi)）未接種過新冠病毒疫苗或未感染過新冠病毒的新型冠狀病毒感染肺炎的疑似病例；新冠病毒特異性IgM抗體/IgG抗體聯(lián)合檢測、總抗體檢測預(yù)期適用于未接種過新冠病毒疫苗及既往未感染過新冠病毒的疑似病例。有關(guān)“疑似病例”的定義，參照現(xiàn)行有效的《新型冠狀病毒感染的肺炎診療方案》執(zhí)行。
臨床試驗的入組人群應(yīng)能夠代表產(chǎn)品適用人群的各種類型，包括新型冠狀病毒感染的肺炎確診病例、排除病例等。
其中確診病例應(yīng)包括不同疾病進(jìn)程的患者（如發(fā)病初期、中期、恢復(fù)期患者等）。
3. 臨床試驗樣本要求
新型冠狀病毒抗體檢測試劑適用的樣本類型一般包括血清、血漿、靜脈全血、毛細(xì)血管全血等，試劑盒樣本采集建議按照《新型冠狀病毒感染的肺炎實驗室檢測技術(shù)指南》進(jìn)行。
對于不同的樣本類型，如臨床前研究證實檢測性能沒有差異（如血清、血漿樣本檢測性能沒有差異），則臨床試驗中可匯總統(tǒng)計,但應(yīng)注意臨床試驗應(yīng)保證每種樣本類型均有試驗體外診斷試劑檢測陽性與陰性的樣本。臨床試驗中亦可進(jìn)行兩種樣本類型的同源比對。
如產(chǎn)品適用的不同樣本類型差異較大（如：血清與靜脈全血、靜脈全血與毛細(xì)血管全血），建議針對不同樣本類型進(jìn)行同源比對，亦可分別按照臨床試驗設(shè)計與已上市同類產(chǎn)品或臨床參考標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行比對。
4. 臨床試驗樣本量
臨床試驗過程中建議根據(jù)產(chǎn)品性能及相關(guān)的統(tǒng)計學(xué)參數(shù)采用合理的統(tǒng)計模型對最低樣本量進(jìn)行估算。其中臨床評價指標(biāo)的確定應(yīng)依據(jù)該產(chǎn)品前期研究情況。以下針對不同臨床試驗設(shè)計分別進(jìn)行樣本量的建議。
4.1與已上市同類產(chǎn)品的比對研究
如臨床試驗采用試驗用體外診斷試劑與已上市同類產(chǎn)品進(jìn)行比對的試驗設(shè)計，建議對比試劑檢測陽性樣本不少于200例，陰性樣本不少于300例。?
臨床試驗樣本量除需滿足上述最低樣本量要求外，還應(yīng)保證入組病例覆蓋受試者的各種特征；如針對確診病例應(yīng)涵蓋疾病感染的各個進(jìn)程，病毒感染早期、中期病例應(yīng)分別不應(yīng)低于所有確診的25%。
4.2 與臨床參考標(biāo)準(zhǔn)的比對研究
如臨床試驗采用試驗體外診斷試劑與臨床參考標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行比對研究。針對確診病例，試驗體外診斷試劑針對不同疾病進(jìn)程的病例產(chǎn)品臨床性能存在差異，為了充分確認(rèn)產(chǎn)品針對不同疾病進(jìn)程病例的臨床性能，建議每一疾病階段（早期、中期和后期）病例數(shù)不少于70例。早期病例一般指發(fā)病0-7天的病例；中期病例一般指發(fā)病8-14天病例；后期病例一般指14天以后病例。針對排除病例，排除病例建議不少于300例。
4.3 不同樣本類型樣本量要求
如申報產(chǎn)品適用于不同樣本類型，臨床試驗需進(jìn)行不同樣本類型的同源比對時，每種樣本類型的陽性和陰性樣本例數(shù)建議均不少于70例。
5. 臨床試驗結(jié)果的統(tǒng)計分析
5.1 與已上市同類產(chǎn)品比對
如臨床試驗?zāi)康臑轵炞C申報產(chǎn)品與已上市產(chǎn)品的一致性，統(tǒng)計分析一般以2×2表的形式總結(jié)兩種分析方法的檢測結(jié)果，并據(jù)此計算陽性符合率、陰性符合率、總符合率、Kappa值等指標(biāo)及其可信區(qū)間。除此之外，還應(yīng)同時進(jìn)行假設(shè)檢驗評價兩種分析方法的一致性。
如產(chǎn)品臨床試驗采用其他統(tǒng)計學(xué)模型進(jìn)行統(tǒng)計分析，如優(yōu)效性試驗等，應(yīng)充分說明其合理性。
5.2 與臨床參考方法比對
臨床試驗中針對有新型冠狀病毒感染的確診/排除結(jié)論的病例，應(yīng)以臨床診斷標(biāo)準(zhǔn)為對照，以2×2表的形式統(tǒng)計試驗體外診斷試劑的總體臨床靈敏度和特異度。同時，針對不同病程階段的患者進(jìn)行分層分析。臨床性能的綜合評價指標(biāo)及各亞組評價指標(biāo)均應(yīng)滿足臨床對此類檢測試劑的要求。
為評價IgG和IgM聯(lián)合檢測的臨床意義，除針對IgG和IgM檢測結(jié)果進(jìn)行分別統(tǒng)計外，還應(yīng)進(jìn)行兩項指標(biāo)綜合評價的統(tǒng)計分析。
臨床試驗中所有不一致結(jié)果均應(yīng)結(jié)合患者的流行病學(xué)背景、臨床癥狀、疾病轉(zhuǎn)歸等信息進(jìn)行充分的分析。
5.3 不同樣本類型的統(tǒng)計分析
臨床試驗如涉及確認(rèn)不同樣本類型同源比對的臨床性能，統(tǒng)計分析一般以2×2表的形式總結(jié)兩種樣本類型的檢測結(jié)果，并據(jù)此計算陽性符合率、陰性符合率、總符合率、Kappa值等指標(biāo)及其可信區(qū)間。除此之外，還應(yīng)同時進(jìn)行假設(shè)檢驗評價兩種樣本類型檢測結(jié)果的一致性。
6. 境外臨床試驗數(shù)據(jù)的認(rèn)可
境外臨床試驗數(shù)據(jù)應(yīng)符合《接受醫(yī)療器械境外臨床試驗數(shù)據(jù)技術(shù)指導(dǎo)原則》和《使用體外診斷試劑境外臨床試驗數(shù)據(jù)的注冊審查指導(dǎo)原則》的相關(guān)要求。提交完整的臨床試驗方案、報告和倫理審查意見，以及該數(shù)據(jù)適用于中國患者人群的論證資料、境內(nèi)外臨床試驗質(zhì)量管理差異的對比資料和臨床試驗質(zhì)量管理差異對于臨床試驗結(jié)果影響的論證資料。
注冊申請人應(yīng)根據(jù)上述臨床試驗技術(shù)審評要求，論證境外臨床試驗數(shù)據(jù)的充分性。
7. 臨床評價資料的形式要求
申請人應(yīng)按照《體外診斷試劑注冊管理辦法》《關(guān)于公布體外診斷試劑注冊申報資料要求和批準(zhǔn)證明文件格式的公告》等法規(guī)文件要求提交臨床評價綜述、各機(jī)構(gòu)倫理審查意見、臨床試驗方案和臨床試驗小結(jié)以及臨床試驗總結(jié)報告。
臨床試驗數(shù)據(jù)匯總表作為臨床試驗小結(jié)的附件提交。數(shù)據(jù)表中應(yīng)包括檢測病例的編號、年齡、性別、樣本類型、采集時間、臨床診斷背景信息、本產(chǎn)品檢測結(jié)果、對比試劑檢測結(jié)果（如有）及新型冠狀病毒感染的確診或排除結(jié)果等，臨床應(yīng)用的數(shù)據(jù)集中每一病例編號應(yīng)能夠溯源。鑒于抗體的產(chǎn)生與病原體感染病程密切相關(guān)，建議在臨床背景信息中詳述患者發(fā)病時間、癥狀變化、疾病轉(zhuǎn)歸等，為了確認(rèn)入組病例是否為產(chǎn)品預(yù)期適用人群，建議提供病例的疫苗接種情況（具體要求參見附表）。
（五）產(chǎn)品說明書和標(biāo)簽樣稿
產(chǎn)品說明書格式應(yīng)滿足《體外診斷試劑說明書編寫指導(dǎo)原則》的要求。產(chǎn)品說明書中技術(shù)內(nèi)容應(yīng)與注冊申報資料中的相關(guān)研究結(jié)果保持一致，如某些內(nèi)容引用自參考文獻(xiàn)，應(yīng)以規(guī)范格式進(jìn)行標(biāo)注，并單獨列明文獻(xiàn)的相關(guān)信息。新型冠狀病毒（2019-nCoV）抗體檢測試劑說明書編寫應(yīng)重點關(guān)注以下內(nèi)容：
1.【預(yù)期用途】
產(chǎn)品預(yù)期用途的描述應(yīng)符合現(xiàn)行的疾病防治指南，其臨床試驗入組病例應(yīng)能夠覆蓋產(chǎn)品適用人群。建議產(chǎn)品預(yù)期用途包括如下內(nèi)容：
針對新冠病毒特異性IgM檢測試劑，其預(yù)期用途為用于體外定性檢測近期未接種新冠病毒疫苗或未感染過新冠病毒人群的血清、血漿、靜脈全血、毛細(xì)血管全血（樣本類型根據(jù)產(chǎn)品驗證與確認(rèn)情況而定）樣本中新型冠狀病毒（2019-nCoV）IgM抗體；針對新冠病毒特異性IgM抗體/IgG抗體聯(lián)合檢測、總抗體檢測，其預(yù)期用途為用于體外定性檢測未接種新冠病毒疫苗或未感染過新冠病毒人群的血清、血漿、靜脈全血、毛細(xì)血管全血（樣本類型根據(jù)產(chǎn)品驗證與確認(rèn)情況而定）樣本中新型冠狀病毒（2019-nCoV）IgM抗體/IgG抗體、總抗體，如針對該預(yù)期用途產(chǎn)品為IgM抗體、IgG抗體未在一個注冊單元，建議分別在兩個產(chǎn)品中明確聯(lián)合檢測的要求。
檢測結(jié)果僅用作對新型冠狀病毒核酸檢測陰性疑似病例的補(bǔ)充檢測指標(biāo)或疑似病例診斷中與核酸檢測協(xié)同使用，不能作為新型冠狀病毒感染的肺炎確診和排除的依據(jù)，不適用于一般人群的篩查。
檢測結(jié)果為陽性還需進(jìn)一步確認(rèn)，檢測結(jié)果陰性不能排除感染的可能性。
本試劑盒檢測結(jié)果僅供臨床參考，建議結(jié)合患者臨床表現(xiàn)和其他實驗室檢測對病情進(jìn)行綜合分析。
開展新型冠狀病毒實驗室檢測，應(yīng)符合《新冠病毒樣本采集和檢測技術(shù)指南》等的要求，做好生物安全工作。
該產(chǎn)品僅限醫(yī)療機(jī)構(gòu)使用。
2.【樣本要求】重點明確以下內(nèi)容：
2.1樣本采集：明確采集時間、采集順序、采集量等，是否受臨床癥狀、用藥情況等因素的影響。說明采集方法及樣本類型，對于血漿、全血樣本，應(yīng)注明對抗凝劑的要求。
2.2干擾物的影響：明確常見干擾物對實驗結(jié)果是否產(chǎn)生影響，明確可接受的最大干擾物濃度。
2.3樣本處理及保存：樣本處理方法、保存條件（如冷藏、冷凍等）及不同保存條件下的保存時限和運輸條件等。冷藏、冷凍樣本檢測前是否需要恢復(fù)室溫，冷凍樣本的凍融次數(shù)限制等。
2.4應(yīng)包括樣本應(yīng)采用的滅活方式，采用該方式的依據(jù)，以及滅活需要的時間等。
3.【檢驗方法】
詳細(xì)說明試驗操作的各個步驟：
3.1實驗環(huán)境：實驗室的溫度、濕度要求，檢測試劑及樣本的復(fù)溫要求等。
3.2試劑配制方法，試劑開封后使用方法等。
3.3高濃度樣本稀釋的方法。
3.4試驗條件：操作步驟、溫度、時間、儀器波長等。
3.5質(zhì)量控制：操作步驟，質(zhì)控結(jié)果的要求（試驗有效性的判斷），質(zhì)控結(jié)果不符合要求的處理方式。
3.6對于膠體金法檢測試劑可以圖示形式顯示正確的檢驗操作方法、程序等。特別注意應(yīng)強(qiáng)調(diào)操作溫度及濕度條件、讀取結(jié)果的時間。
3.7特別說明檢驗操作過程中的注意事項。
4.【陽性判斷值】建議將陽性判斷值確定與驗證的方法，采用的樣本及例數(shù)總結(jié)至該項下。
5.【檢驗結(jié)果的解釋】
結(jié)合質(zhì)控線/對照品/質(zhì)控品/校準(zhǔn)品以及樣本的檢測結(jié)果，對所有可能出現(xiàn)的結(jié)果組合及相應(yīng)的解釋進(jìn)行詳述。對于膠體金法檢測試劑可采用圖示形式顯示檢測結(jié)果。檢驗結(jié)果的解釋應(yīng)以陽性判斷值的研究結(jié)論為依據(jù)。如有適用的臨床診療指南，則應(yīng)在此項下引用，相應(yīng)檢驗結(jié)果的解釋應(yīng)符合相關(guān)指南的要求。如有灰區(qū)判定，詳細(xì)說明灰區(qū)樣本的處理方法。
6.【檢驗方法的局限性】
綜合產(chǎn)品的預(yù)期用途、臨床背景、檢測方法及適用范圍等信息，對可能出現(xiàn)的局限性進(jìn)行相關(guān)說明，建議包括以下內(nèi)容：
6.1本產(chǎn)品檢測結(jié)果僅供臨床參考，不應(yīng)作為臨床診治的唯一依據(jù)，對患者的臨床管理應(yīng)結(jié)合其癥狀/體征、病史、其他實驗室檢測（尤其是病原學(xué)檢測）、治療反應(yīng)及流行病學(xué)等信息綜合考慮。
6.2不合理的樣本采集、轉(zhuǎn)運、處理及不當(dāng)?shù)膶嶒灢僮骱蛯嶒灜h(huán)境均有可能導(dǎo)致假陰性或假陽性結(jié)果。
6.3根據(jù)機(jī)體被病毒感染后產(chǎn)生抗體的基礎(chǔ)理論，特異性IgM抗體產(chǎn)生較早，持續(xù)時間較短；IgG抗體產(chǎn)生較晚，持續(xù)時間較IgM抗體長。另外，由于病毒感染到機(jī)體產(chǎn)生特異性抗體需經(jīng)一定時間、抗體的強(qiáng)度存在個體差異，與感染抗原的量及抗原的抗原性強(qiáng)度相關(guān)。所以應(yīng)將IgM抗體檢測結(jié)果、IgG抗體檢測結(jié)果、采樣時間、臨床指征及出現(xiàn)時間等綜合考慮?？贵w檢測陽性者也應(yīng)結(jié)合其他臨床指征綜合判斷。
6.4感染初期，抗體可能未產(chǎn)生或者產(chǎn)生水平低于產(chǎn)品檢出限，而產(chǎn)生陰性結(jié)果。檢測陰性不能排除急性感染，對于可疑的樣本建議進(jìn)行病原學(xué)檢測，或至少間隔7天再次檢測。
6.5評價血清學(xué)檢測結(jié)果時需要結(jié)合患者的臨床病程、基礎(chǔ)狀況以及年齡等因素綜合考慮，如：免疫功能低下、缺陷或免疫功能受抑制的人群、產(chǎn)生抗體能力較低的嬰幼兒，可能不產(chǎn)生或產(chǎn)生低滴度的抗體，其血清學(xué)抗體檢測的參考價值有限，可能會導(dǎo)致錯誤的醫(yī)學(xué)解釋。
6.6新冠病毒特異性IgG檢測不適用于曾經(jīng)感染過新冠病毒的人群。
6.7注射過新冠病毒疫苗的人群，其抗體水平可能為陽性，其IgM、IgG抗體檢測的參考價值有限，可能會導(dǎo)致錯誤的醫(yī)學(xué)解釋。
6.8新冠病毒抗體檢測的結(jié)果不能用于評估人體是否已經(jīng)對新冠病毒肺炎具備免疫力,特別是不能用于評估新冠病毒疫苗的作用和功效。
6.9在近幾個月內(nèi)接受過輸血或其他血液制品治療的人群，對其陽性檢測結(jié)果的分析應(yīng)慎重。
6.10該產(chǎn)品為定性分析產(chǎn)品，結(jié)果并不能準(zhǔn)確反映新型冠狀病毒（2019-nCoV）IgM/IgG抗體的滴度。
6.11其他需要說明的局限性等。
7.【產(chǎn)品性能指標(biāo)】
簡述以下性能指標(biāo)：
7.1國家標(biāo)準(zhǔn)品和企業(yè)參考品符合率。
7.2檢出限：簡要介紹評價方法、所用樣本情況以及評價結(jié)果。
7.3對包容性的研究情況進(jìn)行總結(jié)。
7.4對精密度的研究情況進(jìn)行總結(jié)。
7.5分析特異性
7.5.1交叉反應(yīng)：詳述交叉反應(yīng)驗證的病原體種類，及有/無交叉反應(yīng)的濃度水平。
7.5.2干擾試驗：說明驗證的干擾物質(zhì)種類及有/無干擾反應(yīng)的濃度水平。
7.6臨床試驗：簡要介紹試驗方法、受試者及樣本、試驗結(jié)果和結(jié)論等。
8.【注意事項】
8.1本產(chǎn)品僅用于體外診斷。
8.2明確本試劑盒所采用的生物學(xué)來源的組分，雖經(jīng)滅活，但不能保證其不具有潛在傳染性，需要嚴(yán)格按照生物安全有關(guān)規(guī)定操作，遵循實驗室操作的常規(guī)規(guī)定。所有樣品、洗滌液（如適用）和各種廢棄物均應(yīng)按污染物處理。
8.3試劑操作的注意事項，如是否需要平衡至室溫再使用，是否需要搖勻等。不同批號的試劑是否可以混用。
8.4有關(guān)實驗操作、樣本保存及處理等其他注意事項。
三、參考文獻(xiàn)
1.《體外診斷試劑注冊與備案管理辦法》（國家市場監(jiān)督管理總局令第48號）[Z].
2.《關(guān)于公布體外診斷試劑注冊申報資料要求和批準(zhǔn)證明文件格式的公告》（國家藥品監(jiān)督管理局公告2021年第122號）[Z].
3. 中華人民共和國衛(wèi)生健康委員會. 新型冠狀病毒感染的肺炎診療方案(試行第九版) [Z]. 2022-03-15.
4. 中華人民共和國衛(wèi)生健康委員會.新型冠狀病毒肺炎防控方案（第八版）[Z].2021-05-14.
5. 中華人民共和國衛(wèi)生健康委員會疾病預(yù)防控制局. 新冠病毒疫苗接種技術(shù)指南（第一版）[Z].2021-03-29.
附件3?
新型冠狀病毒（2019-nCoV）抗原檢測試劑注冊審查指導(dǎo)原則
本指導(dǎo)原則旨在指導(dǎo)注冊申請人對新型冠狀病毒（2019-nCoV）抗原檢測試劑注冊申報資料的準(zhǔn)備及撰寫，同時也為技術(shù)審評部門提供參考。
本指導(dǎo)原則是對新型冠狀病毒（2019-nCoV）抗原檢測試劑的一般要求，注冊申請人應(yīng)依據(jù)產(chǎn)品的具體特性確定其中內(nèi)容是否適用。若不適用，需具體闡述理由及相應(yīng)的科學(xué)依據(jù)，并依據(jù)產(chǎn)品的具體特性對注冊申報資料的內(nèi)容進(jìn)行充實和細(xì)化。
本指導(dǎo)原則是對注冊申請人和技術(shù)審評人員的指導(dǎo)性文件，但不包括注冊審批所涉及的行政事項，也不作為法規(guī)強(qiáng)制執(zhí)行，如果有能夠滿足相關(guān)法規(guī)要求的其他方法，也可以采用，但需要提供詳細(xì)的研究和驗證資料，相關(guān)人員應(yīng)在遵循法規(guī)的前提下使用指導(dǎo)原則。
本指導(dǎo)原則是在現(xiàn)行法規(guī)和標(biāo)準(zhǔn)體系以及當(dāng)前認(rèn)知水平下制定的，隨著法規(guī)和標(biāo)準(zhǔn)的不斷完善以及科學(xué)技術(shù)的不斷發(fā)展，相關(guān)內(nèi)容也將適時進(jìn)行調(diào)整。
一、適用范圍
新型冠狀病毒（2019-nCoV）屬于β屬冠狀病毒，有包膜，顆粒呈圓形或橢圓形，直徑約為60~140nm。具有5個必需基因，分別針對核蛋白（N）、病毒包膜（E）、基質(zhì)蛋白（M）和刺突蛋白（S）4種結(jié)構(gòu)蛋白及RNA依賴性的RNA聚合酶（RdRp）。核蛋白（N）包裹RNA基因組構(gòu)成核衣殼，外面圍繞著病毒包膜（E），病毒包膜包埋有基質(zhì)蛋白（M）和刺突蛋白（S）等蛋白。
實驗室檢查包括一般檢查，病原學(xué)及血清學(xué)檢查，胸部影像學(xué)檢查等。病原學(xué)檢查又包括核酸檢測和抗原檢測。
本指導(dǎo)原則適用于以抗原抗體反應(yīng)為原理，對鼻拭子、咽拭子、鼻咽拭子等上呼吸道樣本中的新型冠狀病毒(2019-nCoV )抗原進(jìn)行體外定性的檢測試劑。
本指導(dǎo)原則適用于新型冠狀病毒（2019-nCoV）抗原檢測試劑注冊申請和變更注冊申請的情形。本指導(dǎo)原則僅針對新型冠狀病毒抗原檢測試劑注冊申報資料中的部分內(nèi)容進(jìn)行撰寫，其他未盡事宜應(yīng)當(dāng)符合《關(guān)于公布體外診斷試劑注冊申報資料要求和批準(zhǔn)證明文件格式的公告》（國家藥品監(jiān)督管理局公告2021年第122號）等相關(guān)法規(guī)要求。
二、注冊審查要點
（一）監(jiān)管信息
1. 產(chǎn)品名稱及分類編碼
產(chǎn)品名稱應(yīng)符合《體外診斷試劑注冊與備案管理辦法》（國家市場監(jiān)督管理總局令第48號）及相關(guān)法規(guī)的要求，如新型冠狀病毒（2019-nCoV）抗原檢測試劑盒（膠體金法）。根據(jù)《體外診斷試劑分類規(guī)則》，該產(chǎn)品按照第三類體外診斷試劑管理，分類編碼為6840。
2. 其他信息還包括產(chǎn)品列表、關(guān)聯(lián)文件、申報前與監(jiān)管機(jī)構(gòu)的聯(lián)系情況和溝通記錄以及符合性聲明等文件。
（二）綜述資料
綜述資料主要包括概述、產(chǎn)品描述、預(yù)期用途、申報產(chǎn)品上市歷史及其他需說明的內(nèi)容。其中，產(chǎn)品描述中應(yīng)詳述檢測原理、產(chǎn)品主要研究結(jié)果的總結(jié)和評價、與同類和/或前代產(chǎn)品的比較等。與同類和/或前代產(chǎn)品的比較，應(yīng)著重從方法學(xué)、檢驗原理、產(chǎn)品主要性能等方面詳細(xì)說明申報產(chǎn)品與目前市場上已獲批同類產(chǎn)品之間的主要區(qū)別。
（三）非臨床資料
1. 產(chǎn)品技術(shù)要求及檢驗報告
1.1 產(chǎn)品技術(shù)要求
注冊申請人應(yīng)當(dāng)在原材料質(zhì)量和生產(chǎn)工藝穩(wěn)定的前提下，根據(jù)產(chǎn)品研制、前期評價等結(jié)果，依據(jù)國家標(biāo)準(zhǔn)、行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)及有關(guān)文獻(xiàn)資料，結(jié)合產(chǎn)品特性按照《醫(yī)療器械產(chǎn)品技術(shù)要求編寫指導(dǎo)原則》（2022年第8號）的要求編寫。該類產(chǎn)品作為第三類體外診斷試劑，應(yīng)當(dāng)以附錄形式明確主要原材料以及生產(chǎn)工藝要求。
如有適用的國家標(biāo)準(zhǔn)、行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)，產(chǎn)品技術(shù)要求的相關(guān)要求應(yīng)不低于相應(yīng)的要求。
1.2 產(chǎn)品檢驗報告
新型冠狀病毒抗原檢測試劑已有國家標(biāo)準(zhǔn)品，技術(shù)要求中應(yīng)體現(xiàn)國家標(biāo)準(zhǔn)品的相關(guān)要求，并使用國家標(biāo)準(zhǔn)品對三批產(chǎn)品進(jìn)行檢驗。
2. 分析性能研究
注冊申請人應(yīng)采用在符合質(zhì)量管理體系的環(huán)境下生產(chǎn)的試劑盒進(jìn)行所有分析性能研究，提交具體研究方法、試驗方案、試驗數(shù)據(jù)、統(tǒng)計分析等詳細(xì)資料。
如申報產(chǎn)品適用不同的機(jī)型，需要提交在不同機(jī)型上進(jìn)行評估的資料。如申報產(chǎn)品包含不同的包裝規(guī)格，需要對各包裝規(guī)格進(jìn)行分析或驗證。對于不同的樣本類型應(yīng)分別提交相應(yīng)的分析性能評估資料。配套的不同保存液或裂解液至少應(yīng)進(jìn)行檢出限、精密度、包容性、干擾研究。
分析性能評估所用樣本的基本信息均需明確，例如樣本來源、樣本類型、采集和處理方式、稀釋方式、定值過程及數(shù)據(jù)等。研究中采用的新型冠狀病毒樣本，應(yīng)采用合理方法對樣本進(jìn)行標(biāo)定，包括拷貝數(shù)、Ct值、TCID50值等。分析性能評估用樣本應(yīng)為真實樣本或病毒培養(yǎng)物，如需稀釋應(yīng)采用陰性基質(zhì)進(jìn)行稀釋。
建議著重對以下分析性能進(jìn)行研究：
2.1 樣本穩(wěn)定性
應(yīng)充分考慮實際使用過程中樣本采集、處理、運輸及保存等各個階段的條件，對不同類型樣本的穩(wěn)定性分別進(jìn)行評價并提交研究資料。內(nèi)容包括建議的保存條件、保存液、裂解液和運輸條件（如涉及）等。如樣本采集后需加入保存液、裂解液等，應(yīng)同時對處理后的樣本進(jìn)行樣本穩(wěn)定性的研究。建議對不同的滅活方式進(jìn)行驗證。
2.2 適用的樣本類型
列明產(chǎn)品適用的樣本類型。
2.3 精密度
應(yīng)對精密度指標(biāo)，如標(biāo)準(zhǔn)差或變異系數(shù)等的評價標(biāo)準(zhǔn)做出合理要求。
應(yīng)考慮運行、時間、操作者、儀器、試劑批次和地點等影響精密度的條件，設(shè)計合理的精密度試驗方案進(jìn)行評價。
設(shè)定合理的精密度評價周期，例如：為期至少20天的檢測，具體方案可參考性能評價相關(guān)文件進(jìn)行。
用于精密度評價的臨床樣本應(yīng)至少包含3個水平：陰性樣本、臨界陽性樣本、（中或強(qiáng)）陽性樣本，并根據(jù)產(chǎn)品特性設(shè)定適當(dāng)?shù)木芏纫螅?/span>
①陰性樣本：待測物濃度低于檢出限或為零濃度，陰性檢出率應(yīng)為100%（n≥20）。
②臨界陽性樣本：待測物濃度略高于試劑盒的檢出限，陽性檢出率應(yīng)≥95%（n≥20）。
③中/強(qiáng)陽性樣本：待測物濃度呈中度到強(qiáng)陽性，陽性檢出率為100%且CV≤15%（n≥20）,或條帶結(jié)果顯色均一。
2.4 包容性
使用具有時間和區(qū)域特征性的不同來源的至少10例樣本進(jìn)行驗證，驗證內(nèi)容應(yīng)包括重復(fù)性、檢出限等，提供樣本及濃度的確認(rèn)方法、試驗數(shù)據(jù)。樣本應(yīng)覆蓋目前國內(nèi)變異株的常見類型，以考察對不同變異株的檢出能力。
2.5 檢出限
2.5.1檢出限的確定
建議對病毒進(jìn)行梯度稀釋后研究確定檢出限，每個梯度的病毒稀釋液重復(fù)3～5份，每份稀釋液重復(fù)檢測不少于20次，將具有95%陽性檢出率的病毒水平作為檢出限。
應(yīng)分別選擇不同來源具有代表性的3個樣本進(jìn)行檢出限的確定。
2.5.2檢出限的驗證
選擇具有時間和區(qū)域特征性的至少3個樣本（與檢出限確定不同樣本）在檢出限濃度水平進(jìn)行驗證，應(yīng)達(dá)到95%陽性檢出率。
應(yīng)提供詳細(xì)的病毒滴度的確定方法，同時應(yīng)詳細(xì)描述病毒樣本的確認(rèn)方法及驗證結(jié)果。
2.6 分析特異性
2.6.1交叉反應(yīng)驗證
地方性人類冠狀病毒（HKU1，OC43，NL63和229E）；SARS冠狀病毒、MERS冠狀病毒。
H1N1（新型甲型H1N1流感病毒（2009）、季節(jié)性H1N1流感病毒）、H3N2、H5N1、H7N9，乙型流感Yamagata、Victoria，副流感病毒Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型，呼吸道合胞病毒A、B型，鼻病毒A、B、C組，腺病毒1、2、3、4、5、7、55型，腸病毒A、B、C、D組，EB病毒、麻疹病毒、人巨細(xì)胞病毒、輪狀病毒、諾如病毒、腮腺炎病毒、水痘-帶狀皰疹病毒、人偏肺病毒。
肺炎支原體、肺炎衣原體、流感嗜血桿菌、金黃色葡萄球菌、肺炎鏈球菌、肺炎克雷伯菌、結(jié)核分枝桿菌、白色念珠菌。
驗證不少于20份正常人樣本。
除SARS冠狀病毒和MERS冠狀病毒可采用重組蛋白外，各病原體均應(yīng)采用臨床樣本或培養(yǎng)物進(jìn)行驗證。提供所有用于交叉反應(yīng)驗證的病原體樣本的來源、陰陽性、種屬/型別和濃度/滴度確認(rèn)等試驗資料。建議在病原體的醫(yī)學(xué)相關(guān)水平進(jìn)行交叉反應(yīng)的驗證，如病毒濃度為105?pfu/mL或更高。
2.6.2內(nèi)源/外源物質(zhì)干擾
建議在每種干擾物質(zhì)的潛在最大濃度（“最差條件”）條件下進(jìn)行評價，在病毒抗原臨界陽性水平進(jìn)行干擾試驗驗證。?
表1 用于干擾試驗的物質(zhì)
2.7 高劑量鉤狀效應(yīng)?
應(yīng)評估高劑量鉤狀效應(yīng)并提交研究資料。
2.8 提供企業(yè)參考品驗證資料：根據(jù)主要原材料研究資料中的企業(yè)參考品設(shè)置情況，采用三批產(chǎn)品對企業(yè)參考品進(jìn)行檢驗并提供詳細(xì)的試驗數(shù)據(jù)。
2.9 反應(yīng)體系
2.9.1反應(yīng)條件確定：注冊申請人應(yīng)考慮反應(yīng)時間、判讀時間、反應(yīng)溫度、洗滌液體積和洗滌次數(shù)（如涉及）等條件對產(chǎn)品性能的影響，通過試驗確定上述條件的最佳組合。
2.9.2反應(yīng)體系中樣本加樣方式及加樣量確定：通過試驗確定最佳的加樣方式及加樣量。如樣本需采取稀釋或其他必要的方法進(jìn)行處理后方可用于最終檢測，還應(yīng)對樣本稀釋液及其用量、其他必要的處理方法等進(jìn)行研究。
2.9.3采樣拭子及樣本保存液的選擇：對拭子頭和拭子桿的材質(zhì)要求。明確保存液或裂解液的成分、濃度、使用量的要求等。
3. 穩(wěn)定性研究資料
穩(wěn)定性研究主要包括實時穩(wěn)定性（有效期）、開瓶（開封）穩(wěn)定性、高溫加速破壞穩(wěn)定性、運輸穩(wěn)定性等，注冊申請人可根據(jù)實際需要選擇合理的穩(wěn)定性研究方案。穩(wěn)定性研究資料應(yīng)包括研究方法的確定依據(jù)、具體的實施方案、詳細(xì)的研究數(shù)據(jù)以及結(jié)論。對于實時穩(wěn)定性研究，應(yīng)提供至少三批樣品在實際儲存條件下保存至成品有效期后的研究資料。
4. 陽性判斷值研究
提交對申報試劑陰性/灰區(qū)/陽性等結(jié)果判斷的陽性判斷值（cut-off,CO）確定的研究資料，包括具體的試驗方案、人群及受試者樣本選擇、評價標(biāo)準(zhǔn)、統(tǒng)計學(xué)分析和研究數(shù)據(jù)等。建立陽性判斷值使用的樣本來源的選擇應(yīng)考慮到不同的地理區(qū)域、不同的感染階段和生理狀態(tài)等因素的影響。如果產(chǎn)品適用不同樣本類型，需要對所有樣本類型進(jìn)行陽性判斷值的驗證。
如適用，可采用受試者工作特征曲線（receiver operating characteristic curve, ROC）的分析方式來選擇確定合理的陽性判斷值；如結(jié)果存在灰區(qū)（equivocal zone），應(yīng)明確灰區(qū)建立的基礎(chǔ)。如采用其他方法對陽性判斷值進(jìn)行確認(rèn)研究，應(yīng)說明這種方法的合理性。
5. 其他資料
5.1主要原材料研究資料
此產(chǎn)品的主要原材料包括抗體、質(zhì)控品（線）、參考品等。應(yīng)提供主要原材料的選擇與來源、制備過程、質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)等相關(guān)研究資料。如主要原材料為企業(yè)自制，應(yīng)提供其詳細(xì)制備過程；如主要原材料源于外購，應(yīng)提供資料包括：選擇該原材料的依據(jù)及對比篩選試驗資料、供應(yīng)商提供的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)、出廠檢驗報告，以及該原材料到貨后的質(zhì)量檢驗資料，供應(yīng)商應(yīng)固定，不得隨意更換。
5.1.1新型冠狀病毒特異的抗體
病原體特異的抗體是該類產(chǎn)品的關(guān)鍵原材料。由于新型冠狀病毒不同地域、不同人群感染的毒株之間存在的差異尚未明確，因此在選擇抗體原料時，應(yīng)注重結(jié)合表位的選擇，避免毒株間差異造成的假陰性，亦應(yīng)考慮抗原在其他冠狀病毒的表達(dá)情況，避免存在交叉反應(yīng)出現(xiàn)假陽性。原材料研究資料中應(yīng)詳述該方面的考慮。
首先應(yīng)詳述抗體所針對的抗原表位、抗體制備所用免疫原以及確定該抗體作為主要原材料的依據(jù)，此外應(yīng)提交抗體來源、制備、篩選、鑒定及質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)（外觀、蛋白濃度、純度、分子量、效價、功能性試驗等）等詳細(xì)試驗資料。
自制抗體，如使用天然抗原作為免疫原，應(yīng)提供該天然抗原的來源；如使用重組抗原或其他人工合成抗原作為免疫原，應(yīng)提供相應(yīng)的核酸或者蛋白序列信息。針對抗體的制備、鑒定等過程，應(yīng)提交詳細(xì)的研究資料和工藝穩(wěn)定性驗證資料。
外購抗體，應(yīng)詳述抗體的名稱及生物學(xué)來源，供應(yīng)商名稱；提交供應(yīng)商選擇的研究資料及供應(yīng)商出具的抗體性能指標(biāo)及檢驗報告。
5.1.2其他主要原材料
除上述主要原材料外，產(chǎn)品中包含的其他主要原材料，如二級抗體、膠體金、發(fā)光物、硝酸纖維素膜、微孔板、樣本稀釋液、提取液等，均應(yīng)進(jìn)行選擇及驗證，并提交相關(guān)資料。明確供應(yīng)商和質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)。
5.1.3試劑盒質(zhì)控品/質(zhì)控線
產(chǎn)品應(yīng)設(shè)置合理的質(zhì)控品/質(zhì)控線。質(zhì)控品應(yīng)至少包含陰性和陽性兩個水平。提交相關(guān)原料的來源、選擇和性能確認(rèn)等相關(guān)研究資料，明確供應(yīng)商和質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)。注冊申請人應(yīng)對質(zhì)控品的檢測結(jié)果做出明確的范圍要求（試驗有效性的判斷）。
5.1.4企業(yè)參考品
該類產(chǎn)品的企業(yè)參考品一般包括陽性參考品、陰性參考品、檢出限參考品和重復(fù)性參考品。應(yīng)根據(jù)產(chǎn)品性能驗證的實際需要設(shè)置企業(yè)參考品。
應(yīng)提交企業(yè)參考品的原料來源、選擇、制備、陰陽性及濃度/滴度確認(rèn)方法或試劑等相關(guān)驗證資料。企業(yè)參考品應(yīng)采用臨床樣本，或者使用病毒培養(yǎng)液加入陰性基質(zhì)。企業(yè)參考品的設(shè)置建議如下：
5.1.4.1陽性參考品
陽性參考品應(yīng)考慮覆蓋不同來源及特征的樣本，可選擇至少各5份確認(rèn)為陽性的樣本，并設(shè)置不同滴度水平。
5.1.4.2陰性參考品
陰性參考品應(yīng)考慮檢測特異性的評價，建議包括冠狀病毒（HKU1、OC43、NL63、229E）、流感病毒、腸道病毒、呼吸道合胞病毒、腺病毒等抗原陽性樣本。
5.1.4.3檢出限參考品
可設(shè)置系列稀釋樣本，其中應(yīng)包含檢出限水平。
5.1.4.4重復(fù)性參考品
建議包括高、低兩個濃度的樣本，其中一個濃度應(yīng)為檢出限附近的濃度。
5.2?生產(chǎn)工藝的研究資料
5.2.1產(chǎn)品基本反應(yīng)原理介紹。
5.2.2生產(chǎn)工藝介紹，可用流程圖方式表示，并簡要說明主要生產(chǎn)工藝的確定依據(jù)。
5.2.3包被/標(biāo)記工藝研究，注冊申請人應(yīng)考慮如包被/標(biāo)記液量、濃度、時間、條件等指標(biāo)對產(chǎn)品性能的影響，通過試驗確定上述指標(biāo)的最佳組合。
5.2.4顯色系統(tǒng)、酶作用底物等的介紹以及最適條件研究。
（四）臨床評價資料
該類試劑應(yīng)通過臨床試驗路徑進(jìn)行臨床評價。臨床試驗應(yīng)符合《體外診斷試劑注冊與備案管理辦法》（國家市場監(jiān)督管理總局令第48號）、《體外診斷試劑臨床試驗技術(shù)指導(dǎo)原則》（國家藥品監(jiān)督管理局通告2021年第72號）的要求，如相關(guān)法規(guī)、文件有更新，臨床試驗應(yīng)符合更新后的要求。下面僅說明該類產(chǎn)品臨床試驗中應(yīng)關(guān)注的重點問題。
1. 產(chǎn)品臨床性能評價
1.1試驗方法
采用試驗體外診斷試劑與已上市、靈敏度較高的新型冠狀病毒核酸檢測試劑進(jìn)行對比試驗的方法，對產(chǎn)品臨床性能進(jìn)行評價?？紤]到產(chǎn)品可能的適用人群和使用場景，試驗體外診斷試劑檢測可由經(jīng)專業(yè)培訓(xùn)的實驗室人員操作，或者由非專業(yè)使用者進(jìn)行檢測。
如試驗體外診斷試劑檢測由非專業(yè)使用者進(jìn)行檢測，為了實現(xiàn)盲法操作，避免因受試者已經(jīng)知曉自身的感染狀態(tài)而引入偏倚，臨床試驗應(yīng)按照方案要求順序納入新型冠狀病毒肺炎的疑似病例，不應(yīng)納入已知感染狀態(tài)的受試者。樣本量應(yīng)根據(jù)篩選人群發(fā)病率進(jìn)行適當(dāng)?shù)慕y(tǒng)計學(xué)估算，最終入組受試者中陽性例數(shù)應(yīng)滿足最低要求。這種試驗方法主要適用于人群發(fā)病率較高時的情形。
如試驗體外診斷試劑由經(jīng)專業(yè)培訓(xùn)的實驗室人員檢測，則為了充分評價試驗體外診斷試劑對于所有目標(biāo)人群及使用場景的適用性，還應(yīng)同時選取一定量受試者進(jìn)行新型冠狀病毒抗原檢測試劑非專業(yè)使用者檢測與經(jīng)專業(yè)培訓(xùn)的實驗室人員檢測的對比試驗。非專業(yè)使用者檢測時除了產(chǎn)品說明書等生產(chǎn)企業(yè)提供的必要信息外不應(yīng)接受任何形式的培訓(xùn)和指導(dǎo)。
對比試驗中，試驗體外診斷試劑與對比試劑應(yīng)盡量針對同一份樣本或同步采集的相同樣本類型（采樣順序應(yīng)隨機(jī)）樣本進(jìn)行檢測。若尚無相同樣本類型核酸檢測試劑批準(zhǔn)上市，也可選擇適合的同源樣本，如鼻咽拭子或口咽拭子樣本進(jìn)行對比試劑檢測。應(yīng)對對比試劑的選擇進(jìn)行充分論述，特別是對比試劑靈敏度能否滿足評價要求、試驗體外診斷試劑與對比試劑的可比性等，應(yīng)進(jìn)行充分討論。對比試劑檢測過程應(yīng)符合該產(chǎn)品說明書要求。
1.2受試者選擇
臨床試驗的入組人群應(yīng)來自產(chǎn)品的預(yù)期適用人群。根據(jù)前期研究數(shù)據(jù)，新型冠狀病毒抗原檢測主要適用于急性感染期患者，建議為出現(xiàn)癥狀后7天之內(nèi)的患者。臨床試驗方案中應(yīng)根據(jù)相關(guān)研究數(shù)據(jù)明確受試者入組標(biāo)準(zhǔn)，并說明依據(jù)。入組受試者應(yīng)能夠代表產(chǎn)品適用人群的各種情形，例如：應(yīng)包括不同年齡、性別受試者；陽性病例應(yīng)包括不同病毒載量（根據(jù)同步核酸檢測結(jié)果確定）的病例，以及出現(xiàn)癥狀不同時間（1～7天）的病例；陰性病例應(yīng)包括有疑似癥狀的其他呼吸道病原體感染病例等。
臨床試驗中需要進(jìn)行非專業(yè)使用者檢測操作的受試者應(yīng)為無醫(yī)學(xué)或?qū)嶒炇覚z驗相關(guān)專業(yè)背景、且不具有任何體外診斷試劑操作經(jīng)驗、符合產(chǎn)品預(yù)期適用范圍的人，并能夠代表不同年齡段、不同教育水平、不同專業(yè)背景人群。特別是60歲以上的老年人以及初中或初中以下教育水平的受試者應(yīng)占有一定的比例。
1.3樣本量
針對新型冠狀病毒抗原檢測試劑與新型冠狀病毒核酸檢測試劑的對比試驗，根據(jù)已有研究數(shù)據(jù)進(jìn)行初步估算，建議對比試劑（核酸檢測試劑）檢測陽性樣本不少于200例，陰性樣本不少于300例。為了對產(chǎn)品臨床性能進(jìn)行充分評價，陽性樣本中，不同病毒載量樣本（依據(jù)對比試劑檢測結(jié)果確定）應(yīng)分別具有足夠的樣本量：以核酸檢測試劑陽性判斷值Ct≤38為例，建議Ct值≤30的陽性樣本例數(shù)不低于170例，Ct值＞30的陽性樣本例數(shù)不低于30例。
針對新型冠狀病毒抗原檢測試劑非專業(yè)使用者檢測與經(jīng)專業(yè)培訓(xùn)的實驗室人員檢測的對比試驗，建議納入至少70例抗原陽性受試者，70例抗原陰性受試者，應(yīng)盡可能納入尚未確認(rèn)新型冠狀病毒感染狀態(tài)的疑似病例。當(dāng)人群發(fā)病率維持較低水平時，根據(jù)臨床試驗需要，陽性受試者可以視情形納入已知感染狀態(tài)的受試者。
如果試驗體外診斷試劑同時適用于多種上呼吸道樣本類型，則每種樣本類型應(yīng)分別具有一定數(shù)量的陽性和陰性樣本，建議均不少于70例。除上呼吸道樣本之外，如試驗體外診斷試劑還適用于其他樣本類型，建議針對樣本類型的適用性進(jìn)行充分的論證與臨床研究，相關(guān)樣本類型的樣本量應(yīng)進(jìn)行合理的統(tǒng)計學(xué)估算。
新型冠狀病毒抗原檢測中樣本采集和處理方式是影響產(chǎn)品性能的重要因素，應(yīng)在非臨床研究中進(jìn)行充分評價，并在臨床試驗過程中嚴(yán)格遵循說明書要求。
如試驗體外診斷試劑同時適用于多種反應(yīng)體系（包括不同樣本保存液等），且經(jīng)非臨床研究證明，分析性能沒有差異，可選擇典型的反應(yīng)體系進(jìn)行臨床試驗；如非臨床研究證明，分析性能存在差異，則應(yīng)針對不同的反應(yīng)體系分別進(jìn)行臨床試驗，并分別計算樣本量。
1.4臨床試驗機(jī)構(gòu)
臨床試驗應(yīng)在不少于3家（含3家）、具備相應(yīng)條件且按照規(guī)定備案的醫(yī)療器械臨床試驗機(jī)構(gòu)開展。
1.5臨床試驗結(jié)果的統(tǒng)計分析
描述性統(tǒng)計分析，應(yīng)對入組人群進(jìn)行人口學(xué)分析，包括年齡、性別和臨床診斷背景信息等。
臨床試驗結(jié)果一般以2×2表的形式進(jìn)行總結(jié)，并據(jù)此計算陽性符合率、陰性符合率、總符合率及其95%置信區(qū)間。同時應(yīng)針對不同病毒載量（根據(jù)核酸檢測結(jié)果）和不同樣本類型等進(jìn)行分層分析。
臨床試驗中所有不一致結(jié)果均應(yīng)結(jié)合患者同步臨床診斷結(jié)果或其他檢測試劑檢測結(jié)果等信息進(jìn)行充分的分析。
2.?可用性評價
可用性評價的目的在于確認(rèn)說明書易讀性以及非專業(yè)使用者按照說明書完成全部檢測流程的能力。入組人群應(yīng)參考“1.2中受試者選擇”中的相關(guān)要求，總例數(shù)建議不少于30例，無需納入新型冠狀病毒感染陽性病例。
可用性評價中由非專業(yè)使用者按照說明書要求完成采樣、檢測、結(jié)果解讀等全部過程，整個過程由一位專業(yè)人員觀察并記錄，記錄內(nèi)容應(yīng)至少包括主要的質(zhì)控點，例如樣本采集方式是否正確、樣本量是否充足、是否可能發(fā)生樣本污染、檢測過程是否正確、結(jié)果判讀是否正確等，特別是過程中遇到的任何困難，應(yīng)詳細(xì)記錄，并給出總體可用性評價。
上述過程完成后，受試者應(yīng)填寫統(tǒng)一的問卷，以評價說明書的易讀性，包括樣本采集、檢測過程及結(jié)果判讀等各個方面，并對產(chǎn)品說明書易讀性進(jìn)行總體評價。
3.?結(jié)果判讀能力評價
所有參與可用性評價的受試者應(yīng)針對各種類型檢測結(jié)果進(jìn)行判讀（應(yīng)為檢測后的檢測實物，可以使用模擬樣本獲得檢測結(jié)果），供判讀的結(jié)果應(yīng)包括陽性、弱陽性、陰性、無效結(jié)果，評價受試者的判讀正確率。
4.?境外臨床試驗數(shù)據(jù)的認(rèn)可
境外臨床試驗數(shù)據(jù)應(yīng)符合《接受醫(yī)療器械境外臨床試驗數(shù)據(jù)技術(shù)指導(dǎo)原則》和《使用體外診斷試劑境外臨床試驗數(shù)據(jù)的注冊審查指導(dǎo)原則》的相關(guān)要求。提交完整的臨床試驗方案、報告和倫理審查意見，以及該數(shù)據(jù)適用于中國患者人群的論證資料、境內(nèi)外臨床試驗質(zhì)量管理差異的對比資料和臨床試驗質(zhì)量管理差異對于臨床試驗結(jié)果影響的論證資料。
注冊申請人應(yīng)根據(jù)上述臨床試驗技術(shù)審評要求，論證境外臨床試驗數(shù)據(jù)的充分性。有關(guān)可用性評價和結(jié)果判讀能力評價應(yīng)在境內(nèi)完成。
5. 臨床評價資料的形式要求
申請人應(yīng)按照《體外診斷試劑注冊與備案管理辦法》（國家市場監(jiān)督管理總局令第48號）、《關(guān)于公布體外診斷試劑注冊申報資料要求和批準(zhǔn)證明文件格式的公告》（2021年第122號）等法規(guī)文件要求提交臨床評價綜述、各機(jī)構(gòu)倫理審查意見、臨床試驗方案、臨床試驗小結(jié)以及臨床試驗報告。資料內(nèi)容及格式應(yīng)符合《體外診斷試劑臨床試驗技術(shù)指導(dǎo)原則》的相關(guān)要求，其中臨床試驗數(shù)據(jù)庫應(yīng)符合《體外診斷試劑臨床試驗數(shù)據(jù)遞交要求注冊審查指導(dǎo)原則》的相關(guān)要求。
臨床試驗數(shù)據(jù)匯總表作為臨床試驗小結(jié)的附件提交。數(shù)據(jù)表中應(yīng)包括檢測病例的編號、年齡、性別、樣本類型、患者發(fā)病時間、樣本采集時間、臨床診斷背景信息、試驗體外診斷試劑檢測結(jié)果、對比試劑檢測結(jié)果及新型冠狀病毒感染的確診或排除結(jié)果等。
（五）產(chǎn)品說明書和標(biāo)簽樣稿
產(chǎn)品說明書格式應(yīng)滿足《體外診斷試劑說明書編寫指導(dǎo)原則》的要求。產(chǎn)品說明書的所有內(nèi)容均應(yīng)與注冊申請人提交的注冊申報資料的相關(guān)研究結(jié)果保持一致。如某些內(nèi)容引用自參考文獻(xiàn)，則應(yīng)以規(guī)范格式對此內(nèi)容進(jìn)行標(biāo)注，并單獨列明參考文獻(xiàn)的相關(guān)信息。
產(chǎn)品說明書編寫建議參考附件中的模板。
1.【預(yù)期用途】
本產(chǎn)品用于體外定性檢測XX樣本（根據(jù)具體情況描述）中新型冠狀病毒（2019-nCoV）XX抗原（根據(jù)實際情況描述）。
適用人群參照《新冠病毒抗原檢測應(yīng)用方案（試行）》等國家相關(guān)規(guī)定執(zhí)行。
本產(chǎn)品不能單獨用于新型冠狀病毒感染的診斷，陽性結(jié)果僅表明樣本中可能存在新型冠狀病毒特定抗原，應(yīng)結(jié)合核酸檢測結(jié)果判斷感染狀態(tài)。陰性結(jié)果不能排除新型冠狀病毒感染，也不得單獨作為作出治療和疾病管理決定的依據(jù)。有相應(yīng)臨床癥狀的疑似患者抗原檢測不管是陽性還是陰性，均應(yīng)進(jìn)行進(jìn)一步的核酸檢測。
檢測陽性受試者應(yīng)遵循當(dāng)?shù)匾咔榉揽卣哌M(jìn)行報告和隔離，并尋求相應(yīng)的醫(yī)療幫助；檢測陰性受試者應(yīng)嚴(yán)格遵守當(dāng)?shù)匾咔榉揽匾螅匾獣r采用核酸檢測進(jìn)行確認(rèn)。
產(chǎn)品使用環(huán)境應(yīng)遵循《新冠病毒抗原檢測應(yīng)用方案（試行）》等國家相關(guān)規(guī)定。
2.【檢驗原理】
描述試劑盒的技術(shù)原理，可結(jié)合圖示進(jìn)行說明。
3.【主要組成成分】
3.1詳細(xì)說明試劑盒內(nèi)各組分的名稱、數(shù)量、成分、濃度等信息，如含有生物源性物質(zhì)，應(yīng)說明其（生物學(xué)）來源、活性及其他特性；對于膠體金、熒光免疫層析法等試劑應(yīng)描述試劑條/卡結(jié)構(gòu)組成。說明不同批號試劑盒中各組分是否可以互換。
3.2試劑盒中不包含但對該項檢測必需的組分，應(yīng)列出相關(guān)試劑的生產(chǎn)企業(yè)、產(chǎn)品名稱以及注冊證號等信息。
4.【儲存條件及有效期】
說明試劑盒的效期穩(wěn)定性、開封穩(wěn)定性等，應(yīng)標(biāo)明具體的儲存條件及效期，明確溫濕度要求。
5.【適用儀器】（如適用）
注明所有適用的儀器型號，并提供與儀器有關(guān)的重要信息以指導(dǎo)用戶操作。酶標(biāo)儀應(yīng)明確波長要求。
6.【樣本要求】
說明對樣本采集、處理、保存等方面的要求，包括采樣要求、采集器的要求、離心條件、運送條件、保存條件及效期、凍融要求、預(yù)處理方法等，相關(guān)內(nèi)容應(yīng)經(jīng)過前期驗證。
7.【檢驗方法】
7.1試驗環(huán)境：檢測試劑及樣本的復(fù)溫要求等。
7.2試劑配制方法，試劑開封后使用方法等。
7.3樣本稀釋的方法。
7.4試驗條件：操作步驟、溫度、時間、儀器條件等。
7.5質(zhì)量控制：操作步驟，質(zhì)控結(jié)果的要求（試驗有效性的判斷），質(zhì)控結(jié)果不符合要求的處理方式。
7.6可采用圖示形式顯示正確的檢驗操作方法、程序及注意事項等。特別注意應(yīng)強(qiáng)調(diào)操作溫度及濕度條件、讀取結(jié)果的時間。
7.7特別說明檢驗操作過程中的注意事項。
8.【陽性判斷值】（如適用）
明確陽性判斷值，簡要描述陽性判斷值確定的試驗方法。
9.【檢驗結(jié)果的解釋】
描述檢測結(jié)果的判定標(biāo)準(zhǔn)或計算方法，如有灰區(qū)判定，應(yīng)詳細(xì)說明灰區(qū)樣本的處理方法。建議可采用圖示形式描述結(jié)果判讀方法（例如膠體金、熒光免疫層析法等試劑）。
10.【檢驗方法的局限性】
綜合產(chǎn)品的預(yù)期用途、臨床背景、檢測方法及適用范圍等信息，對可能出現(xiàn)的局限性進(jìn)行相關(guān)說明。例如：
10.1本試劑盒的檢測結(jié)果僅供臨床參考，對患者的臨床診治應(yīng)結(jié)合其癥狀/體征、病史、其他實驗室檢查及治療反應(yīng)等情況綜合考慮。
10.2有關(guān)假陽性結(jié)果的可能性分析
如果樣本在運輸、處理過程中發(fā)生交叉污染，則可能導(dǎo)致假陽性結(jié)果；
試驗過程中使用的耗材、設(shè)備等受污染，則可能導(dǎo)致假陽性結(jié)果。
10.3有關(guān)假陰性結(jié)果的可能性分析
不合理的樣本采集、轉(zhuǎn)運、儲存及處理、樣本中病原體含量過低均有可能導(dǎo)致假陰性結(jié)果；該病原體的突變可能會導(dǎo)致假陰性結(jié)果。
11.【產(chǎn)品性能指標(biāo)】
簡述以下性能指標(biāo)：
11.1國家標(biāo)準(zhǔn)品和企業(yè)參考品符合情況。
11.2檢出限：簡要介紹評價方法、所用病毒株或樣本情況以及評價結(jié)果。
11.3對包容性的研究情況進(jìn)行總結(jié)。
11.4對精密度的研究情況進(jìn)行總結(jié)。
11.5分析特異性
11.5.1交叉反應(yīng)：詳述交叉反應(yīng)驗證的病原體種類，及有/無交叉反應(yīng)的濃度水平。
11.5.2干擾物質(zhì)：說明驗證的干擾物質(zhì)種類及有/無干擾反應(yīng)的濃度水平。
11.6鉤狀（HOOK）效應(yīng)：對高劑量鉤狀效應(yīng)的驗證情況進(jìn)行總結(jié)。
11.7臨床試驗：簡要介紹試驗方法、受試者及樣本、試驗結(jié)果和結(jié)論等。
12.【注意事項】
有關(guān)試驗操作、樣本保存及處理等注意事項。
三、參考文獻(xiàn)
1.《體外診斷試劑注冊與備案管理辦法》（國家市場監(jiān)督管理總局令第48號）[Z].
2.《關(guān)于公布體外診斷試劑注冊申報資料要求和批準(zhǔn)證明文件格式的公告》（國家藥品監(jiān)督管理局公告2021年第122號）[Z].
3.中華人民共和國衛(wèi)生健康委員會. 新型冠狀病毒感染的肺炎診療方案(試行第九版) [Z]. 2022-03-15.
4.中華人民共和國衛(wèi)生健康委員會.新型冠狀病毒肺炎防控方案（第八版）[Z].2021-05-14.
附件?
新型冠狀病毒（2019-nCoV）抗原檢測
試劑盒（XXXX法）說明書
【產(chǎn)品名稱】
新型冠狀病毒（2019-nCoV）抗原檢測試劑盒（XXXX法）
【包裝規(guī)格】
根據(jù)實際情況描述
【預(yù)期用途】
本產(chǎn)品用于體外定性檢測XX樣本（根據(jù)具體情況描述）中新型冠狀病毒（2019-nCoV）XX抗原（根據(jù)實際情況描述）。
適用人群參照《新冠病毒抗原檢測應(yīng)用方案（試行）》等國家相關(guān)規(guī)定執(zhí)行。
本產(chǎn)品不能單獨用于新型冠狀病毒感染的診斷，陽性結(jié)果僅表明樣本中可能存在新型冠狀病毒特定抗原，應(yīng)結(jié)合核酸檢測結(jié)果判斷感染狀態(tài)。陰性結(jié)果不能排除新型冠狀病毒感染，也不得單獨作為作出治療和疾病管理決定的依據(jù)。有相應(yīng)臨床癥狀的疑似患者抗原檢測不管是陽性還是陰性，均應(yīng)進(jìn)行進(jìn)一步的核酸檢測。
檢測陽性受試者應(yīng)遵循當(dāng)?shù)匾咔榉揽卣哌M(jìn)行報告和隔離，并尋求相應(yīng)的醫(yī)療幫助；檢測陰性受試者應(yīng)嚴(yán)格遵守當(dāng)?shù)匾咔榉揽匾?，必要時采用核酸檢測進(jìn)行確認(rèn)。
產(chǎn)品使用環(huán)境應(yīng)遵循《新冠病毒抗原檢測應(yīng)用方案（試行）》等國家相關(guān)規(guī)定。
【檢驗原理】
根據(jù)實際情況描述
【主要組成成分】
根據(jù)實際情況描述
【儲存條件及有效期】
根據(jù)實際情況描述
【適用儀器】（如適用）
根據(jù)實際情況描述
【樣本要求】
列出適用的樣本類型,并詳細(xì)描述采樣方法、配套的采樣器、樣本處理、樣本保存方法等。
寫明有關(guān)采樣的詳細(xì)步驟，例如：
鼻咽拭子：
采樣人員一手輕扶被采集人員的頭部，一手執(zhí)拭子貼鼻孔進(jìn)入，沿下鼻道的底部向后緩緩深入，由于鼻道呈弧形，不可用力過猛，以免發(fā)生外傷出血。待拭子頂端到達(dá)鼻咽腔后壁時，輕輕旋轉(zhuǎn)一周（如遇反射性咳嗽，應(yīng)停留片刻），然后緩緩取出拭子，將拭子頭浸入與檢測試紙條配套的含保存液的采樣容器中。
口咽拭子：
被采集人員頭部微仰，嘴張大，并發(fā)“啊”音，露出兩側(cè)咽扁桃體，將拭子越過舌根，在被采集者兩側(cè)咽扁桃體稍微用力來回擦拭至少3次，然后再在咽后壁上下擦拭至少3次，將拭子頭浸入檢測試紙條配套的含保存液的采樣容器中。
鼻拭子：
樣本采集時，先用衛(wèi)生紙擤去鼻涕，小心拆開鼻拭子外包裝，避免手部接觸拭子頭。隨后頭部微仰，一手執(zhí)拭子尾部貼一側(cè)鼻孔進(jìn)入，沿下鼻道的底部向后緩緩深入1-1.5厘米（對于年齡2-14歲受試者，深入1厘米）后貼鼻腔旋轉(zhuǎn)至少4圈（停留時間不少于15秒），隨后使用同一拭子對另一鼻腔重復(fù)相同操作。將拭子頭浸入檢測試紙條配套的含保存液的采樣容器中。?
配清晰的采樣圖示。?
注意：
采樣規(guī)范性會對檢測結(jié)果有影響，建議采樣人員應(yīng)是專業(yè)人員、或經(jīng)過專業(yè)人員指導(dǎo)和培訓(xùn)的人員。
一次性采樣拭子只能搭配同一人份的樣本保存液使用，并且僅可用于采集同一人的樣本，禁止混用。
采樣過程中應(yīng)避免采樣拭子被污染，采樣后應(yīng)立即檢測。
【檢驗方法】
檢測前請仔細(xì)閱讀使用說明書。
詳細(xì)描述檢測過程，包括檢測前準(zhǔn)備、上樣、檢測、結(jié)果讀取、儀器操作方法（如有）、廢棄物處理等。從試劑準(zhǔn)備開始至檢測結(jié)束廢棄物處理。
配清晰檢測圖示。
寫明有關(guān)檢驗方法的注意事項，例如：
1.根據(jù)試劑說明書，將采集樣本后的拭子立即置于采樣管中，拭子頭應(yīng)在保存液中旋轉(zhuǎn)混勻至少30秒，同時用手隔著采樣管外壁擠壓拭子頭至少5次，確保樣本充分洗脫于采樣管中。
2.用手隔著采樣管外壁將拭子頭液體擠干后，將拭子棄去，采樣管蓋蓋后，將液體垂直滴入檢測卡樣本孔中。
3.如果向測試卡中添加的溶液太少，可能會出現(xiàn)假陰性或無效的結(jié)果。
4.請勿在光線昏暗處判讀。
5.請在規(guī)定的時間內(nèi)判讀結(jié)果，少于或者超過該時間判讀可能導(dǎo)致錯誤結(jié)果。
6.使用后的試劑和樣本等廢棄物應(yīng)妥善處理。所有使用后的采樣拭子、采樣管、檢測卡等裝入密封袋，按照《新冠病毒抗原檢測應(yīng)用方案（試行）》中的規(guī)定處理。
【陽性判斷值】（如適用）
根據(jù)實際情況描述
【檢驗結(jié)果的解釋】
根據(jù)實際情況描述，例如：
陽性：兩條紅色或紫色條帶出現(xiàn)。一條位于檢測區(qū)（T）內(nèi)，另一條位于質(zhì)控區(qū)（C）內(nèi)。檢測區(qū)（T）條帶顏色可深可淺，均為陽性結(jié)果。
陰性：僅質(zhì)控區(qū)（C）出現(xiàn)一條紅色或紫色條帶，檢測區(qū)（T）內(nèi)無條帶出現(xiàn)。
無效：質(zhì)控區(qū)（C）未出現(xiàn)紅色或紫色條帶，無論檢測區(qū)（T）是否出現(xiàn)條帶。表明結(jié)果無效，需重新取試紙條重測。
配清晰的結(jié)果圖示。
?
陽性結(jié)果表示：樣本中檢出新型冠狀病毒抗原，懷疑新型冠狀病毒感染，請立即上報并按防控規(guī)定隔離、就診。
陰性結(jié)果表示：樣本中沒有檢出新型冠狀病毒抗原，但陰性結(jié)果不能完全排除感染的可能，應(yīng)按照當(dāng)?shù)匾咔榉揽卣哌M(jìn)行后續(xù)處置，必要時建議去醫(yī)院進(jìn)一步檢查。?
【檢驗方法的局限性】
根據(jù)實際情況描述，例如：
1.本試劑為定性體外診斷試劑，供輔助診斷用。檢測結(jié)果僅用于臨床輔助診斷，不是臨床診斷的唯一依據(jù)，應(yīng)結(jié)合臨床癥狀及其它檢測指標(biāo)綜合判定。
2.本試劑僅用于定性檢測人XX樣本中存在的新型冠狀病毒抗原。
3.陽性結(jié)果僅表明可能存在新型冠狀病毒抗原，不能作為新型冠狀病毒感染的唯一判斷標(biāo)準(zhǔn)。
4.陰性結(jié)果并不能完全排除新型冠狀病毒感染的可能性，可能是新型冠狀病毒抗原水平過低還不能被本試劑盒檢測出來，或者其他原因?qū)е录訇幮越Y(jié)果。
5.可能由于技術(shù)上或步驟上的操作不當(dāng)、樣本被污染、干擾檢測的藥物的存在導(dǎo)致不一致或錯誤的結(jié)果。
6.樣本的采集及處理方法對病毒檢測有比較大的影響，操作不當(dāng)可能導(dǎo)致錯誤的結(jié)果。
【產(chǎn)品性能指標(biāo)】
根據(jù)實際情況總結(jié)
【注意事項】
根據(jù)實際情況描述，例如：
1.本試劑僅用于體外檢測，試驗前請仔細(xì)閱讀本說明書。
2.本試劑為一次性使用體外診斷試劑，請勿重復(fù)使用。
3.本試劑必需在有效期內(nèi)使用。
4.應(yīng)按說明書嚴(yán)格進(jìn)行操作，請勿混合使用不同批次的檢測卡和樣本保存液等。
5.操作失誤或樣本量過少都有可能導(dǎo)致檢測結(jié)果出現(xiàn)偏差。
6.如果檢測卡的塑料包裝袋損壞，請不要使用該產(chǎn)品。
7.請勿吸入樣本保存液。
8.鋁箔袋內(nèi)有干燥劑，不得內(nèi)服。
9.嚴(yán)格按照說明書要求儲存。
10.樣本保存液中的試劑含有少量防腐劑，可能對皮膚和眼睛造成刺激。如果該溶液接觸到皮膚或眼睛，用大量的水清洗/沖洗。如發(fā)生皮膚刺激或皮疹，應(yīng)求醫(yī)/就診。
操作時應(yīng)注意做好安全措施，使用前后清洗或消毒雙手等。
【標(biāo)識的解釋】
【參考文獻(xiàn)】
【基本信息】
【醫(yī)療器械注冊證編號/產(chǎn)品技術(shù)要求編號】
【說明書核準(zhǔn)及修改日期】
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